Analisi PCR per epatite C e interpretazione dei risultati

L'epatite C è una grave malattia virale che si verifica nel corpo del paziente sotto l'influenza di batteri come l'HCV. A seconda dello stadio di sviluppo, una tale patologia può verificarsi senza sintomi o manifestarsi come ittero, diminuzione dell'attività e altri disturbi funzionali. Allo stesso tempo, questa malattia può essere curata solo nelle prime settimane, mentre il suo agente patogeno è nel periodo di incubazione. Nella fase iniziale, un'analisi qualitativa dell'epatite C può diagnosticare un'infezione..

Fatti generali sull'epatite C

L'epatite di categoria C è considerata la più pericolosa tra tutte le patologie virali, poiché ha un'altissima suscettibilità alle mutazioni. Una volta nel corpo, i componenti dell'RNA cambiano costantemente la loro struttura, a causa della quale il sistema immunitario non può produrre autonomamente gli anticorpi giusti per la cura naturale della malattia. Ciò consente all'infezione di diffondersi senza troppi ostacoli..

Dopo alcune settimane, il virus si trasforma in uno stato tale che una persona inizia a sentire i primi sintomi, manifestati nella forma:

  • Vertigini periodiche;
  • Nausea o persino vomito;
  • Fatica cronica;
  • Dolore nell'ipocondrio destro;
  • Febbre.


Dopo la fase di esacerbazione, la malattia diventa cronica. Con l'aiuto della terapia farmacologica, il paziente può supportarlo solo nel periodo di incubazione, evitando ripetute ricadute.

Indicazioni per la diagnosi

Uno studio qualitativo delle cellule RNA del virus dell'epatite C non viene effettuato su richiesta del paziente, le indicazioni per tale procedura possono servire solo:

  • Lo studio dei tessuti cresciuti usando la biopsia;
  • Lo studio della leucemia e dei tumori maligni;
  • Diagnosi del corpo per la presenza di patologie genetiche in esso;
  • Identificazione della persona confrontando i fluidi corporei del paziente con i biomateriali disponibili;
  • Rilevazione dell'agente causale di un'infezione virale (con epatite mista).

Inoltre, l'analisi dell'RNA può mostrare una valutazione dell'efficacia dell'attuale corso di terapia, che è molto importante nel trattamento della malattia virale.

Cos'è l'analisi PCR?

Lo studio della reazione a catena della polimerasi è un'analisi approfondita del sangue, che viene effettuata al fine di rilevare le cellule di virus RNA in esso. A seconda della direzione, questa procedura può mostrare:

  • La presenza o l'assenza di epatite nel corpo (un tipo qualitativo di PCR);
  • Carica virale sul sistema immunitario (test quantitativo che mostra il livello di acido ribonucleico nel sangue);
  • Genotipo attuale della malattia (genotipizzazione).

Di tutti i test di cui sopra, solo il primo viene eseguito senza errori. Sulla base dei risultati della sua decrittazione, il medico sarà in grado di scoprire maggiori dettagli sulla malattia attuale.

I principali vantaggi dello studio

Se confrontiamo l'analisi della PCR con procedure quali: controllo dell'umidità corporea, ELISA e ecografia, il primo test avrà una serie di vantaggi caratteristici:

  • Alta velocità di elaborazione dei risultati;
  • La capacità di studiare quasi tutti i fluidi biologici umani (sudore, lacrime, sangue, raschiatura dalla mucosa e persino dall'epitelio della pelle);
  • La presenza di un indicatore di carica virale;
  • Disinfezione completa del materiale di prova (tale procedura viene eseguita prima dell'inizio dell'analisi PCR, al fine di prevenire le infezioni attraverso il liquido ottenuto);
  • Elevato contenuto informativo (questa reazione mostra non solo la presenza del virus, ma determina anche la sua natura).

È importante saperlo! L'unico inconveniente del test PCR per l'epatite C è la necessità di una formazione complessa del personale e delle attrezzature.

PCR qualitativa per l'epatite C

Il risultato di una PCR di alta qualità per l'epatite C è un indicatore fondamentale dell'intero studio, perché grazie ad esso, il medico può determinare la presenza di patologia nel paziente. Ma una risposta negativa alla reazione di cui sopra non indicherà sempre un corpo completamente sano. Infatti, se il numero di cellule RNA scende al di sotto di un livello accettabile, la scansione PCR semplicemente non le noterà.

Decrittazione dei risultati dell'analisi

I test qualitativi della PCR per la presenza di RNA dell'epatite C possono mostrare solo due possibili risposte. Considera i valori che indicano lo stato normale di una persona e la patologia in corso.

Norma

Un normale indicatore di uno studio qualitativo della reazione a catena della polimerasi è un risultato negativo del test. Si osserva con un valore zero della carica virale e l'assenza di un genotipo rilevato. Ma al fine di verificare completamente la loro sicurezza, è meglio che il paziente sia sottoposto a una serie di procedure aggiuntive in grado di identificare le malattie che portano all'infezione da epatite C..

deviazioni

Se il test PCR ha mostrato una risposta positiva, allora questo è un chiaro segno che un virus è presente nel corpo della persona studiata. A seconda del valore quantitativo (da 1,8x a 2,4x), il medico sarà in grado di determinare l'attuale fase del suo sviluppo, che sarà il primo passo nella stesura del corretto corso della terapia. E con l'aiuto della genotipizzazione, è possibile rilevare la categoria di epatite anche prima delle sue manifestazioni caratteristiche (indicatori B1, B2 o B3).

Risultati falsi positivi e falsi negativi

Lo stesso test PCR non si sbaglia quasi mai. Ma sotto l'influenza del fattore umano, la probabilità di una falsa diagnosi aumenta in modo significativo. Pertanto, al fine di ottenere la decodifica più corretta, prima di condurre una reazione a catena della polimerasi, devono essere prese in considerazione le seguenti regole:

  1. Tutti i biomateriali studiati dovrebbero trovarsi a una distanza decente l'uno dall'altro (la combinazione di eventuali biocomponenti causerà sempre un risultato falso positivo);
  2. È necessario conservare e trasportare i liquidi ottenuti per l'analisi in appositi contenitori protetti dove si osserva il regime di temperatura (i componenti biologici perdono molto facilmente le loro proprietà, il che provoca anche una falsa diagnosi);
  3. Prima di lavorare con i biomateriali, la stanza del laboratorio deve essere ben trattata in modo che nessun detrito penetri nel liquido di prova;
  4. L'uso di reagenti scaduti è severamente vietato (tale negligenza non è rara nelle moderne istituzioni mediche).

È importante saperlo! La correttezza del risultato della PCR può dipendere dal paziente stesso, se non segue le regole di preparazione per il prelievo di sangue. Il risultato di ciascuna di queste situazioni sarà un secondo test.

Frequenza dell'analisi PCR

La medicina moderna non impone restrizioni sull'analisi PCR di alta qualità per l'epatite C. Ma eseguono questa procedura per ogni categoria di pazienti un certo numero di volte. Vale a dire:

  • Per le persone nel cui corpo non c'è patologia - non più di 1-2 volte all'anno;
  • Pazienti che sono in corso di trattamento dell'epatite C - 2 volte (prima di iniziare la terapia e più vicini al suo centro);
  • Donne in gravidanza - almeno 1-2 volte al mese, durante il periodo di portamento del feto (quindi il test viene eseguito non più di 2 volte l'anno);
  • Neonati di diverse settimane - almeno 2 volte l'anno.

Per la sua sicurezza, il metodo PCR viene spesso utilizzato anche per i neonati, che è considerato un altro vantaggio significativo..

Il costo della reazione a catena della polimerasi è notevolmente diverso dagli studi standard. Per questo motivo, alcune persone non possono permetterselo. Ma secondo altri criteri, questo test non ha concorrenti, quindi i medici lo raccomandano più spesso..

PCR per epatite C

PCR - una moderna diagnosi di epatite C

L'epatite virale C è una delle malattie più "insidiose" del fegato. Per lungo tempo, è asintomatico, il che porta a un processo cronico (nell'80%). Nella maggior parte dei casi, termina con la fibrosi epatica, che scorre nella cirrosi o in un tumore dell'organo.

Di particolare importanza sono i metodi di diagnosi precoce della malattia. La reazione a catena della polimerasi (PCR) consente di diagnosticare alcuni giorni dopo l'infezione.

Brevemente sull'epatite virale C

Patogeno - RNA contenente un virus che ha diversi sottotipi. Penetra nel corpo umano attraverso il sangue: sessualmente, attraverso trasfusioni di sangue, iniezione e altre procedure mediche invasive.

La forma acuta della malattia non ha sintomi significativi. A volte c'è una gravità nell'ipocondrio destro, che la maggior parte dei pazienti non nota.

La forma cronica porta a una violazione di tutte le funzioni epatiche: intossicazione, dolore addominale, ittero, dolori articolari e molti altri. A questo punto, il processo diventa irreversibile..

Spesso l'epatite cronica C diventa il precursore della degenerazione maligna del tessuto epatico.

L'essenza del metodo PCR

Con la PCR, l'RNA virale viene determinato 5 giorni dopo l'infezione. Durante questo periodo, la risposta immunitaria non è stata ancora lanciata, i risultati di un test sierologico saranno negativi, i sintomi clinici sono completamente assenti.

È la diagnostica PCR che rende possibile fare una diagnosi in una fase precoce della malattia, quando un trattamento adeguato migliora significativamente la prognosi per il paziente. Esistono due tipi di PCR: qualitativa e quantitativa.

Tecnica di qualità

Rileva materiale genetico del virus dell'epatite C in una quantità minima. Il risultato è di due tipi:

  1. "Scoperto" - una reazione positiva, che indica la presenza di una malattia nell'uomo.
  2. "Not Detected" - un'analisi negativa, che indica l'assenza di infezione o la presenza del virus in quantità così piccole che non vengono riparate con questo metodo. Ciò non dà una probabilità del 100% che il paziente non abbia l'epatite virale C..

Il sangue viene spesso utilizzato per l'analisi, ma sono adatti anche saliva, liquido seminale e altri fluidi biologici..

PCR per epatite C

Tecnica quantitativa

Questo è un metodo più complesso e costoso, che viene eseguito secondo determinate indicazioni:

  1. Conferma della diagnosi con PCR qualitativa positiva e rilevazione di anticorpi specifici.
  2. In caso di patologia virale combinata (il virus dell'epatite C spesso "confina" con l'epatite B trasmessa allo stesso modo).
  3. Monitoraggio dell'efficacia della terapia. Per fare questo, scopri il livello di viremia prima del trattamento, quindi a 4, 12, 24 settimane di terapia. Se a 12 settimane il livello del virus non diminuisce di due unità logaritmiche, il farmaco viene selezionato in modo errato.
  4. Diagnosi della transizione da acuta a cronica.

Il numero di unità virali viene calcolato per volume unitario del fluido di prova (di solito 1 ml). Il risultato è espresso in UI / ml o il numero di copie dell'RNA del virus in 1 ml.

Mostra l'intensità della carica virale sul corpo. Maggiore è questo valore, maggiore è la probabilità di trasmettere il virus ad altre persone. La gravità del danno epatico non dipende dal livello di viremia. Per questo, ci sono numerosi, i cosiddetti test epatici..

Preparazione allo studio

La maggior parte delle analisi di falsi negativi deriva dalla non conformità con la tecnologia di analisi. Per evitare ciò, è necessario osservare le seguenti regole:

  1. Escludere completamente i contaminanti dall'ingresso nel biomateriale (condizioni di sterilità assoluta).
  2. La concentrazione minima di eparina nel sangue, utilizzata per prevenire la coagulazione o prescritta al paziente a fini terapeutici, influenza il risultato della PCR. È importante chiarire in anticipo questo problema con il paziente..
  3. Prevenire eventuali sostanze provenienti dall'ambiente che neutralizzano gli enzimi nei sistemi di test PCR.

Tutti questi requisiti si riferiscono alle attività degli assistenti di laboratorio e dei medici. Il paziente non ha bisogno di prepararsi appositamente. Di solito donano sangue a stomaco vuoto, escludono l'alcool.

Vantaggi della PCR

In un esame completo per l'epatite C, la reazione a catena della polimerasi è in primo luogo a causa di una serie di vantaggi:

  1. Isolamento diretto dell'agente patogeno con la capacità di identificare il suo sottotipo. In altri casi (reazioni sierologiche), viene esaminata la risposta del sistema immunitario al virus..
  2. Alta specificità della tecnica. La probabilità di ottenere risultati falsi positivi o falsi negativi è ridotta al minimo (principalmente in caso di violazione della tecnologia dello studio).
  3. Alta sensibilità. La maggior parte dei laboratori e dei sistemi di test fornisce una sensibilità di almeno 50 UI / ml. Esiste una PCR ultra in cui questa cifra è di 10 UI / ml. Ciò significa che il virus dell'epatite C può essere rilevato nei primi giorni dell'infezione..
  4. Universalità. Con la PCR, diversi agenti patogeni dell'epatite vengono rilevati immediatamente, se presenti.

IMPORTANTE! I virus con elevata variabilità del genotipo (epatite C, influenza) "confondono" il sistema immunitario, il che porta a indicatori sfocati di test sierologici (rilevazione di anticorpi specifici). Solo la PCR fornisce una risposta accurata sulla presenza del genotipo patogeno nel corpo.

Interpretazione dei risultati

La PCR per l'epatite C viene solitamente eseguita dopo test sierologici per gli anticorpi. Il più difficile per i pazienti è l'interpretazione della versione quantitativa del metodo. Proviamo a capirlo..

Se il risultato è presentato in UI / ml, i risultati sono descritti come segue (i dati si riferiscono alle apparecchiature e ai sistemi di prova russi):

La quantità di RNA viraleInterpretazione
Non rilevatiNorma (in assenza di altri segni clinici o di laboratorio) o la quantità di virus al di sotto della soglia di sensibilità di questo metodo
Meno di 1,5 x 10 3Il numero è "sotto l'intervallo lineare", che significa la presenza di un agente patogeno nel corpo, ma senza la possibilità di una descrizione quantitativa della carica virale
Meno di 4 x 10 6RNA virale rilevato, viremia bassa (la prognosi è favorevole)
Più di 4 x 10 6RNA virale rilevato, viremia alta
Più di 2 x 10 8La concentrazione è elevata, al di sopra dell'intervallo lineare, il che significa una carica virale molto elevata, che non è descritta dai moderni strumenti di misurazione (prognosi sfavorevole).

La tabella mostra l'opzione di interpretazione per una sola versione dei sistemi di test russi. Ogni laboratorio può utilizzare la propria attrezzatura, dando una differenza di valori. Di solito, il risultato viene emesso con una decodifica pronta o indicando i limiti dei valori normali.

Caratteristiche dell'interpretazione della PCR

I tempi di inizio del trattamento dipendono dalla corretta interpretazione dei risultati dell'analisi, che nel caso dell'epatite C è vitale per il paziente.

Esistono diversi fattori che influenzano la decodifica dei risultati dell'analisi:

  • La qualità dell'attrezzatura e la sensibilità dei sistemi di prova. Ad oggi, il più comune test Cobas Ampicolor HCV e RealBest HCV RNA. La loro sensibilità non è inferiore a 50 UI / ml. Ciò significa che se il virus è presente in una concentrazione inferiore (ad esempio, nei primi giorni di infezione), il risultato dello studio sarà negativo e la malattia progredirà senza trattamento. Più recentemente sono comparsi sistemi diagnostici ultra sensibili (almeno 10 UI / ml). Migliorano significativamente la qualità della diagnosi. Il costo di tale PCR varia ampiamente - da 1800 a 10 mila rubli, a seconda del laboratorio.
  • La diagnosi finale viene fatta solo dopo tre diversi studi sul fluido biologico. Se il risultato è negativo per tre volte, allora non c'è virus dell'epatite C nel corpo del paziente.
  • Per un trattamento efficace, è necessario non solo confermare il fatto dell'infezione da virus, ma anche determinarne il sottotipo: 1a, 1c, 2a, 2c, 2c, 3, 4, 5a, 6.
  • I risultati sono valutati in due unità: ME / ml e il numero di copie di RNA / ml. I loro numeri differiscono esattamente 4 volte, ciò che devi ricordare quando ricevi i risultati dell'analisi a portata di mano.

L'interpretazione della reazione di PCR all'epatite virale C deve essere eseguita da specialisti. Il medico comprende gli indicatori quantitativi e può confrontare la corrispondenza dei risultati di laboratorio con il quadro clinico.

A volte ci sono opzioni di test falsi positivi o falsi negativi e solo un esame completo del paziente consente di "non perdere" questa malattia epatica più grave.

Analisi PCR dell'epatite C (epatite C RNA)

Analisi PCR

L'analisi qualitativa indica la presenza del virus nel sangue. Questo test deve essere eseguito per tutti i pazienti che hanno rilevato anticorpi contro l'epatite C. Il risultato può essere "rilevato" o "non rilevato". I valori di riferimento (il valore che dovrebbe essere normale) è "non rilevato". Il risultato "rilevato" può indicare che il virus si moltiplica e infetta tutte le nuove cellule epatiche. Un test PCR qualitativo ha una certa sensibilità (10-500 UI / ml.). Ciò significa che se il virus è presente nel sangue in una concentrazione molto bassa (al di sotto della soglia di sensibilità del metodo), è possibile ottenere il risultato "non rilevato". Pertanto, quando si esegue una PCR di alta qualità in pazienti con bassa viremia (concentrazione di virus), ad esempio sottoposti a terapia antivirale, è importante conoscere la sensibilità del sistema diagnostico. Per controllare la risposta virologica durante la terapia antivirale, si consiglia di utilizzare un sistema diagnostico con una sensibilità di almeno 50 UI / ml. Ad esempio, analizzatori COBAS AMPLICOR HCV-TEST (sensibilità analitica 50 UI / ml o 100 copie / ml), RealBest HCV RNA (sensibilità analitica 15 UI / ml o 38 copie / ml) e altri.

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Costo PCR

Analisi PCR, il cui costo dipende dai reagenti utilizzati e può variare da 300 rubli. fino a 5000 rubli., eseguito da un giorno a una settimana.

Oltre al metodo PCR, il metodo di amplificazione trascrizionale (TMA) viene utilizzato anche per rilevare l'RNA dell'HCV, che ha una migliore sensibilità (circa 5-10 UI / ml), ma questo metodo non è ancora molto diffuso in Russia.

Quanto spesso devi fare l'epatite C PCR? Di solito viene eseguito immediatamente dopo il rilevamento di anticorpi contro l'epatite C e dopo la 4a, 12a, 24a settimana di terapia antivirale, nonché 24 settimane dopo il completamento dell'OEM, e quindi ogni anno, nel caso di SVR.

Figura. 1. Un esempio dei risultati della PCR di alta qualità dell'epatite C.

L'analisi quantitativa della PCR (carica virale) è un test per la concentrazione del virus (viremia) nel sangue. La carica virale è il numero di unità di materiale genetico (RNA virale) presente in un volume specifico di sangue (di solito 1 ml, che corrisponde a 1 centimetro cubo). Questa quantità è espressa in numeri, unità di misura ME / ml (unità internazionali per millilitro). La quantità di virus può essere visualizzata in diversi modi. Ad esempio, 1,5 milioni UI / ml, che corrispondono a 1.500.000 UI / ml o 1,5 * 10 6 UI / ml. In alcuni laboratori vengono utilizzate altre unità di misura: copie / ml. Il tasso di conversione dalle copie alle unità internazionali è diverso per i diversi sistemi di test. Approssimativamente i valori possono essere calcolati secondo la formula 1 UI / ml = 4 copie / ml, ad esempio 5,5 * 10 5 UI / ml = 2,2 * 10 6 copie / ml.

Cosa influenza la carica virale??

In primo luogo, sull'infettività. Maggiore è la concentrazione del virus, maggiore è il rischio di trasmissione del virus, ad esempio attraverso il contatto sessuale o verticalmente. In secondo luogo, la concentrazione del virus influisce sull'efficacia del trattamento (se il trattamento viene effettuato sulla base dell'interferone). Pertanto, una bassa carica virale è un fattore favorevole durante il trattamento e un fattore avverso molto elevato. Inoltre, la PCR quantitativa è di grande importanza quando si esegue la terapia con interferone per valutarne il successo e pianificare la durata del corso. Quindi, con una rapida risposta al trattamento e una bassa viremia prima della terapia, il tempo di trattamento può essere ridotto. Al contrario, con una lenta diminuzione della concentrazione del virus, l'AVT può essere esteso.

Quale carico è considerato basso e quale è alto?

Alto considerato un carico di oltre 800 * 10 3 o 800.000 ME / ml, che è di circa 300 * 10 4 o 3.000.000 di copie / ml. Un carico superiore a 1 * 10 7 ME / ml è considerato molto elevato. Tuttavia, finora non esiste un'opinione generale tra gli esperti sui valori che distinguono tra viremia alta e bassa. Quindi, in alcuni lavori, la cifra è 400.000 ME / ml..

Quanto spesso devi fare un test quantitativo??

Di solito viene eseguito prima del trattamento e dopo la dodicesima settimana di trattamento per valutarne l'efficacia se l'RNA è ancora determinato da un test qualitativo..

Il risultato di un test quantitativo può essere una valutazione quantitativa della viremia nel formato sopra descritto, nonché i risultati "al di sotto dell'intervallo di misurazione" e "non rilevati".

La soglia di sensibilità della PCR quantitativa è generalmente superiore a quella qualitativa. Quindi, per il sistema COBAS AMPLICOR, è 600 ME / ml. Un risultato "non rilevato" può significare che un test quantitativo e un test qualitativo di conferma non hanno rilevato l'RNA virale. Il risultato "al di sotto dell'intervallo di misurazione" indica che il test quantitativo non ha rivelato l'epatite C RNA, ma il virus è presente in una concentrazione molto bassa (se è stato eseguito contemporaneamente un ulteriore test qualitativo di conferma).

Fig. 2 Esempio di risultato di un test quantitativo..

Analisi PCR per epatite C

L'epatite C è una malattia grave che distrugge il fegato. Può portare alla cirrosi. Tra l'inizio della malattia e il momento in cui gli anticorpi iniziano a essere prodotti, possono essere necessari fino a sei mesi, quindi è impossibile diagnosticare la malattia utilizzando un dosaggio di immunosorbenti enzimatico. Un'analisi tempestiva della malattia e l'inizio del trattamento aiuteranno l'analisi della PCR per l'epatite C..

Indicazioni per lo studio

Quando è necessario passare un'analisi:

  • se il test immunoenzimatico ha dato un risultato positivo;
  • il paziente ha sintomi di cirrosi o danni al fegato: cambia di dimensioni, la milza diventa più grande, le vene dilatate sono visibili nell'addome, la pelle diventa gialla, i dolori si osservano nella parte destra dell'addome;
  • l'attività di ALT e AST nell'analisi del sangue è aumentata;
  • prima di iniziare il trattamento, al fine di determinare la quantità di virus nel sangue di una persona infetta;
  • per vedere quanto è stata efficace la terapia. Dopo il trattamento - per monitorare la tua salute ed evitare le ricadute;
  • se viene diagnosticata l'epatite B per escludere un danno epatico misto;
  • dopo un rapporto con una persona infetta da epatite.

Obiettivi del sondaggio

Lo scopo della PCR (o reazione a catena della polimerasi) è studiare la composizione del sangue e rilevare flavivirus (epatite C). Un vantaggio significativo di questa analisi è che riconosce il virus nella fase in cui non ha ancora iniziato il processo di reazioni irreversibili. La PCR ti consente di vedere quanto è gravemente colpito il corpo, mostra caratteristiche qualitative e determina il genotipo del virus. Tutto ciò consente di prescrivere il trattamento più appropriato per ciascun caso specifico..

Varietà di analisi

La PCR per la rilevazione dell'epatite C prevede diversi studi:

  • analisi qualitativa;
  • analisi quantitativa;
  • genotipizzazione.

Analisi qualitativa

La PCR è anche chiamata analisi qualitativa. Se mostra un risultato negativo, è impossibile riconoscere il virus nel corpo, poiché il suo contenuto è inferiore a quello che l'attrezzatura può catturare. In tale situazione, è necessario determinare la sensibilità del reagente al fine di regolare l'ulteriore soluzione..

L'analisi può mostrare un risultato positivo in circa cinque giorni dopo l'infezione della persona.

Analisi quantitativa

Questo tipo di studio di analisi dimostra il livello di carica virale, ovvero la concentrazione di flavivirus nel corpo - quanti frammenti del virus sono per 1 cm cubo di sangue del paziente.

Questo tipo di analisi PCR viene prescritto al paziente prima di iniziare la terapia antivirale, o dopo tre mesi di trattamento, per vedere l'efficacia del decorso prescritto..

Questo tipo di analisi mostra:

  • quanto è grande il pericolo di infettare un'altra persona, questa probabilità è direttamente proporzionale alle indicazioni della carica virale;
  • quale trattamento è adatto in questo caso e quanto sarà fruttuoso;
  • durata del trattamento: maggiore è la concentrazione di virus, più lunga sarà la terapia.

Il paziente deve sapere che la gravità della malattia potrebbe non dipendere dal livello di carica virale. A volte, anche con un'alta concentrazione di virus nel sangue del paziente, il fegato è solo leggermente danneggiato. Tuttavia, se una donna incinta ha un alto livello di carica virale, è probabile che trasmetta la malattia a suo figlio.

Si ritiene che la norma più bassa della concentrazione del virus RNA sia fino a 600.000 UI / ml, la media sia da 600.000 a 700.000, il massimo sia da 800.000 e superiore.

genotipizzazione

A causa del fatto che questo virus è suscettibile ad alte mutazioni, è molto importante determinare quale genotipo è nel sangue di una persona durante lo studio. In totale, ci sono 11 genotipi di epatite C e molte delle loro sottospecie. Ma in Russia solo tre sono comuni: 1, 2 e 3.

La genotipizzazione consente di determinare la resistenza del virus. Il metodo di trattamento dipende da questo..

Tutti i genotipi dell'epatite C rispondono in modo diverso al trattamento. 1 genotipo viene trattato per almeno un anno e la possibilità di recupero è di circa il 60%. I genotipi 2 e 3 vengono trattati per sei mesi e la probabilità di sbarazzarsi della malattia è di circa l'85%.

Inoltre, la genotipizzazione consente di vedere in quali condizioni si trova il fegato del paziente. Ad esempio, l'accumulo di grasso nel fegato indica che il paziente soffre di 3 genotipi del virus.

Un esame del sangue in questa fase mostra una figura che caratterizza il genotipo. Occasionalmente, non è possibile determinare il genotipo e le risposte del laboratorio indicano "non digitato". Ciò significa che una persona soffre di un genotipo non comune in questa area geografica. Per rilevarlo, dovrai passare di nuovo l'analisi, ma con il sistema diagnostico in grado di riconoscerlo.

Processo di decodifica

Nelle analisi PCR per l'epatite C ottenute dal laboratorio, di solito vengono indicati alcuni dati e puoi anche decrittografarli da soli:

  • rilevato / non rilevato (analisi qualitativa);
  • numero di virus (analisi quantitativa);
  • numero di genotipo;
  • nome del test.

Si ritiene che la seconda attenzione debba essere prestata al secondo punto, poiché sulla base di questi indicatori è possibile effettuare una previsione, determinare la durata del trattamento e il suo tipo.

Nonostante la chiarezza dell'analisi, non è possibile diagnosticare autonomamente e auto-medicare, i risultati dell'analisi devono essere mostrati al medico curante.

Come prepararsi per l'analisi

Per ottenere un risultato affidabile, è importante osservare una serie di regole:

  1. Vale la pena fare i test al mattino a stomaco vuoto (prova a mangiare per l'ultima volta almeno 8 ore prima della procedura).
  2. Non bere altro che acqua prima di donare il sangue.
  3. Due giorni per eliminare cibi grassi e fritti, oltre all'alcol.
  4. Almeno un'ora è meglio rinunciare alle sigarette.
  5. Non è consigliabile eseguire test dopo massaggi, ultrasuoni o raggi X..
  6. Il giorno prima dell'esame, il paziente dovrebbe abbandonare i farmaci, l'attività fisica e lo stress emotivo.
  7. Mezz'ora prima dell'esame dovrebbe essere calmo e rilassato..

La velocità dell'esame PCR è influenzata da quale tipo di virus soffre il paziente e da quale metodo viene eseguito un esame del sangue. A seconda della complessità, il paziente può ricevere i risultati del test in poche ore o diversi giorni. Ma di solito non ci vogliono più di 7 giorni.

Il costo di un test PCR è influenzato dallo stato della clinica, da dove andrà il paziente e da quanto sarà difficile l'analisi. Il prezzo varia da 400 rubli a 11 mila.

È importante che il paziente sappia che esistono falsi test negativi. Ciò può accadere se il sangue per analisi è stato fatto in modo errato, in violazione delle regole o trasportato in modo inappropriato (ad esempio, è arrivato in laboratorio più di due ore dopo la raccolta). In tale situazione, il paziente corre il rischio di ricevere una falsa impressione del suo stato di salute e di perdere tempo prezioso.

Pertanto, è estremamente importante scegliere la clinica più adatta, che si preoccupa della sua reputazione e non possa permettersi di trascurare i pazienti. Prima di decidere, vale la pena leggere recensioni sull'istituzione e sul suo personale. La scelta è meglio fermarsi in una clinica prestigiosa e ben nota - la probabilità di errore in questo caso sarà piccola.

Diagnosi PCR dell'epatite

Prezzi per la diagnostica PCR dell'epatite

  • Determinazione del genotipo del virus dell'epatite C (virus dell'epite C) 1660 rub.
  • Determinazione del DNA del virus dell'epatite B (virus dell'epite B) nel sangue mediante PCR, uno studio qualitativo su 520 rubli.
  • Determinazione del DNA del virus dell'epatite B (virus dell'epite B) nel sangue mediante PCR, studio quantitativo 1560 rub.
  • Determinazione dell'RNA del virus dell'epatite C (virus dell'epite C) nel sangue mediante PCR, studio qualitativo 570 rub.
  • Determinazione dell'RNA del virus dell'epatite C (virus dell'epite C) nel sangue mediante PCR, studio quantitativo 2600 rub.

La reazione a catena della polimerasi (PCR) è uno dei metodi diagnostici che può ottenere un aumento significativo di piccole concentrazioni di alcuni frammenti di acido nucleico (DNA / RNA) in un materiale biologico (campione) usando l'enzima DNA polimerasi.

Secondo l'Organizzazione mondiale della sanità, oltre 2 miliardi di persone sono infettate dal virus dell'epatite B (HBV); il numero di portatori cronici del virus raggiunge i 400 milioni di persone. Circa 50 milioni di persone vengono infettate dall'HBV ogni anno, di cui circa 2 milioni muoiono. Circa 500 milioni di persone sono infettate dal virus dell'epatite C (HCV). Pertanto, al momento esiste una situazione epidemica piuttosto sfavorevole per le infezioni che causano l'epatite B e l'epatite C.

A questo proposito, è importante utilizzare metodi diagnostici per queste infezioni, che dovrebbero soddisfare le seguenti caratteristiche:

- ottenere risultati di analisi il più presto possibile;

- elevata specificità e sensibilità come prerequisiti per l'affidabilità dell'analisi.

PCR risolve i seguenti compiti:

- diagnosi di infezioni nelle prime fasi della malattia (durante il periodo della finestra sieronegativa);

- indica l'assenza di virus nel sangue con risultati incerti del test immunoenzimatico;

- rivela veri portatori di virus tra gli individui sieropositivi;

- consente di determinare il genotipo dei virus dell'epatite C (1a, 1b, 2,3a / 3b).

La PCR consente la determinazione del DNA del virus dell'epatite B o dell'RNA del virus dell'epatite C nel materiale del test (sangue, puntura del fegato) sia qualitativamente che quantitativamente.

Analisi positiva indica epatite acuta o cronica, risultato negativo - nessuna infezione.

indicazioni

  • Con un aumento dell'analisi biochimica dei livelli ematici di AlAT e AsAT
  • Esame in preparazione per la gravidanza o l'intervento chirurgico
  • Esame di pazienti a cui viene spesso somministrata iniezione endovenosa
  • Con contatto sessuale non protetto
  • Dipendenza
  • In presenza di segni di epatite virale
  • Stagnazione della bile (colestasi)

Metodologia

Per la diagnosi dell'epatite, il metodo Real-Time PCR viene utilizzato sull'analizzatore DT-96, reagenti dell'azienda di tecnologia del DNA.

Formazione

Non è richiesta una preparazione speciale per l'analisi. Si raccomanda di astenersi dal mangiare per 4 ore prima del prelievo di sangue.

Lo studio può essere condotto 2 settimane dopo il tempo stimato di infezione, che consente una diagnosi precoce della malattia.

Grazie al medico per l'operazione, mi sono sdraiato sul tavolo operatorio con facilità e sotto il suo supporto un po 'umoristico e mi sono addormentato, non è stato spaventoso, grazie mille per il lavoro svolto. Più dettagli

Esprimo la mia profonda gratitudine al meraviglioso dottore Titov Dmitry Alekseevich per il trattamento, l'atteggiamento attento e la professionalità! Grazie per il tuo atteggiamento positivo durante il trattamento. Più dettagli

Sono stato curato presso il Dipartimento in IX / 2019-II / 2020, voglio esprimere la mia profonda gratitudine a tutto il team del dipartimento di terapia farmacologica antitumorale sotto la guida della meravigliosa e sensibile dottoressa Shikina Valentina Evgenievna. Grazie all'atmosfera creata nel Dipartimento, un trattamento molto difficile è stato trasferito moralmente facile! Grazie per la professionalità, attenzione. Più dettagli

Ringrazio sinceramente l'ottimo dottor Pavel Yuryevich Orekhov. È successo così che per varie diagnosi ho dovuto sottopormi a cure nel dipartimento di chirurgia vascolare e Pavel Yurievich era il mio medico curante. Sono sicuro che siano le sue azioni professionali, gli appuntamenti e le raccomandazioni. Più dettagli

Dottore eccezionale. Grazie mille per tutto, molto competente, attento e che ora è molto raro nella nostra medicina, lei mira a curare il paziente e aiutarlo, e non solo parlare. Mio marito ed io siamo i suoi pazienti e siamo molto contenti che il destino ci abbia unito a un dottore così meraviglioso. Grazie. Più dettagli

Voglio esprimere la mia profonda gratitudine a Yevgeny Yuryevich Khlopushin per la sua professionalità e l'atteggiamento insolitamente sensibile. Il medico ha affrontato la mia situazione in modo molto competente e completo: ha fatto una diagnosi completa e nel più breve tempo possibile ha organizzato il trattamento preoperatorio necessario. Ha eseguito brillantemente un'operazione complessa, dopo la quale quasi una settimana dopo sono stato in grado di farlo. Più dettagli

Esprimo la mia più profonda gratitudine al chirurgo oncologo, MD Ishchenko Roman Viktorovich per il suo cuore gentile, la massima professionalità e l'atteggiamento sensibile nei confronti dei pazienti. Ringrazio il destino che abbiamo appreso di questo meraviglioso dottore attraverso il programma Salute. Roman Viktorovich ci ha aiutato a far fronte al nostro problema. L'operazione che ha eseguito a mio marito su un passato facile. Più dettagli

Mille grazie al medico coloproctologo Zinovsky Mikhail Vyacheslavovich. Era a un ricevimento l'11 marzo 2020. Dolore acuto, raggiunto a malapena con suo marito, anche se solo dall'altra parte della strada. Ha fatto di tutto, mi sembra, il migliore. Ha dato tutte le raccomandazioni necessarie e il suo numero di telefono. Ha detto di chiamare se ci sono domande. Ho chiamato e consultato con lui. Più dettagli

Nel febbraio 2020 sono finito nel dipartimento di oncologia, dove sono stato incontrato dal capo del dipartimento, Kosy Valentina Vasilievna. Grazie mille per la sua professionalità e attitudine sensibile. Qui ho subito l'operazione più complicata Ischenko Roman Viktorovich e Astakhov Dmitry Anatolyevich. Questi sono i miei tre angeli salvatori.
Ora mi sto riprendendo rapidamente. Più dettagli

Esprimo la mia profonda gratitudine ad Arthur Robertovich per la sua professionalità e le mani "dorate". Ha operato con sua madre due volte nel giugno 2019 e nel febbraio 2020, ed entrambe le volte con successo. Medico molto attento, sensibile e reattivo. Molto pulito nel suo lavoro e questo ha soddisfatto l '"esteta" in termini di cuciture))) Mi ha letteralmente salvato la vita.

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Virus dell'epatite C, plasma RNA (HCV, PCR), qualità.

Con il virus dell'epatite

Virus dell'epatite C.

Informazioni sullo studio

L'epatite C è una malattia epatica infettiva che causa il virus HCV. Il virus dell'epatite C si moltiplica nelle cellule del sangue e infetta le cellule del fegato. Il virus viene trasmesso attraverso il sesso non protetto, attraverso il contatto con il sangue (ad esempio, durante le procedure mediche, le trasfusioni di sangue, usando una singola siringa, ecc.), Da madre a figlio durante la gravidanza o il parto. Lo studio rivela la presenza del virus nel sangue dopo 5-20 giorni dopo una possibile infezione.

Il rilevamento dell'agente causale dell'epatite C (HCV) avviene utilizzando il metodo di reazione a catena della polimerasi in tempo reale. Viene determinata la presenza del materiale genetico (RNA) del virus nel sangue.

Tra tutti gli agenti causali dell'epatite virale, l'HCV presenta il maggior numero di variazioni e, grazie alla sua elevata attività mutazionale, è in grado di evitare i meccanismi protettivi del sistema immunitario umano. Esistono 6 genotipi e molti sottotipi del virus che hanno significati diversi per la prognosi della malattia e l'efficacia della terapia antivirale.
L'epatite C viene trasmessa attraverso il sangue e i fluidi corporei attraverso le vie parenterale, sessuale e transplacentare. Il gruppo ad alto rischio è costituito da persone che praticano l'abuso di droghe per via endovenosa, rapporti sessuali promiscui, nonché operatori sanitari, pazienti che necessitano di emodialisi o trasfusioni di sangue, prigionieri. Penetrando nel corpo, l'HCV entra nei macrofagi del sangue e negli epatociti del fegato, dove si verifica la sua replicazione. Il danno al fegato si verifica principalmente a causa della lisi immunitaria e il virus ha anche un effetto citopatico diretto. La somiglianza dell'antigene virale con gli antigeni del sistema di istocompatibilità umano provoca l'insorgenza di reazioni autoimmuni ("sistemiche"). Nel programma di manifestazioni sistemiche di infezione da HCV, possono comparire tiroidite autoimmune, sindrome di Sjogren, porpora trombocitopenica ideopatica, glomerulonefrite, artrite reumatoide e altre. Rispetto ad altre epatiti virali, l'epatite C ha un quadro clinico meno vivido, più spesso diventa cronico. Nel 20-50% dei casi, l'epatite C cronica porta allo sviluppo della cirrosi epatica e nell'1,25 - 2,50% - allo sviluppo del carcinoma epatocellulare. Complicanze autoimmuni si verificano con alta frequenza.

Il periodo di incubazione è di 5 a 20 giorni. Alla fine del periodo di incubazione, aumentano i livelli di transaminasi epatiche, probabilmente un aumento del fegato e della milza. Il periodo acuto procede con debolezza, perdita di appetito. In un terzo dei casi, c'è una febbre, un'artralgia, un'eruzione polimorfica. Sono possibili fenomeni dispeptici e polineuropatie. La colestasi è estremamente rara..

Indicazioni ai fini dello studio

Preparazione allo studio

Con questo studio, affitto

  • 20.79. AT e AH per HIV 1/2 (screening, qual.)
  • 20.21. Epatite B, HBs Ag (Qual)
  • 20.80. Somma della sifilide. AT (IgG e IgM) (Qual)
  • 20,118. Epatite A, somma anti-HAV. AT (conteggio)
  • 3.9.1. Esame del sangue clinico con formula leucocitaria ed ESR (con microscopia di uno striscio di sangue quando vengono rilevati cambiamenti patologici) (sangue venoso)
  • 27,113. Indicatori di biochimica 8

Risultati della ricerca

Fattori che influenzano i risultati della ricerca

Interpretazione del risultato

  • "Found": un frammento di RNA specifico per il virus dell'epatite C, infezione da virus dell'epatite C, è stato trovato nel campione analizzato di materiale biologico.
  • "Non rilevato": il frammento di RNA specifico per il virus dell'epatite C o la concentrazione di RNA patogeno nel campione al di sotto del limite di sensibilità del test non è stato trovato nel campione analizzato di materiale biologico.