Analisi PCR per epatite C e interpretazione dei risultati

epatologo

Specialità correlate: gastroenterologo, terapista.

Indirizzo: San Pietroburgo, Accademico Lebedev St., 4/2.

L'epatite C è una patologia infiammatoria in cui sono colpite le cellule del fegato. La malattia si sviluppa a causa della penetrazione del virus dell'epatite C (HVC) nel corpo umano..

La forma della malattia può essere acuta o cronica..

Molto spesso, i sintomi di una forma acuta di patologia sono assenti nella maggior parte dei pazienti, a volte la malattia è accompagnata da dolore all'addome, riduzione della capacità lavorativa, aumento della stanchezza, alterazione dell'appetito, una tonalità scura dell'urina, scolorimento delle feci, giallo della pelle e delle mucose, dolori articolari. Questi sintomi di solito si verificano 6-8 settimane dopo l'infezione, ma possono verificarsi sei mesi dopo..

Con lo sviluppo di tali fenomeni, è necessario contattare un'istituzione medica e sottoporsi a un esame completo di tutto l'organismo. Come parte di una visita medica, viene eseguito un esame del sangue per l'epatite C.

Oggi, utilizzando moderne tecniche diagnostiche, questa patologia può essere rilevata nella fase iniziale di sviluppo, il che aumenta significativamente le possibilità di una cura completa per la malattia.

I seguenti gruppi di persone devono superare un'analisi per l'epatite C:

  • donne durante il periodo di gravidanza;
  • persone con segni di epatite;
  • dipendenti di istituti medici;
  • potenziali donatori di organi e sangue;
  • tossicodipendenti, affetti da HIV, persone che conducono una vita intima frenetica.

Elenco degli studi necessari

Quali test devono essere eseguiti con l'epatite C? Per un'accurata diagnosi della malattia, identificandone le cause e determinando lo stato del parenchima epatico, sono necessari i seguenti studi:

  • analisi generale di urina e sangue;
  • analisi del sangue biochimica;
  • Analisi PCR;
  • un esame del sangue per rilevare anticorpi anti-HVC;
  • un esame del sangue per gli anticorpi esistenti alle proprie cellule epatiche;
  • biopsia epatica.

La decrittazione di un esame del sangue per l'epatite C viene eseguita da uno specialista. Considereremo ogni metodo di ricerca in modo più dettagliato e scopriremo anche quale test dell'epatite C è il più accurato..

Analisi generale

Quando si esegue un esame del sangue generale per l'epatite C, è possibile valutare le condizioni del paziente. I cambiamenti nell'emocromo non sono percepiti come sintomi specifici dell'epatite, tuttavia, con questa malattia, disturbi come:

  • la concentrazione di emoglobina, piastrine e globuli bianchi diminuisce;
  • il contenuto di linfociti aumenta;
  • la coagulazione del sangue è compromessa;
  • aumenta la velocità di eritrosedimentazione (VES).

Un'analisi generale dell'urina consente di rilevare l'urobelina, un pigmento biliare che si verifica nelle urine a causa della compromissione della funzionalità epatica.

Analisi biochimiche

Un esame del sangue biochimico per l'epatite C può rilevare violazioni come:

  • aumento del contenuto di enzimi epatici (alanina transaminasi - ALT e aspartato aminotransferasi - AST), che entrano nel flusso sanguigno quando gli epatociti sono danneggiati. In condizioni normali, questi indicatori negli uomini non devono essere superiori a 37 UI / l, nelle donne - non superiori a 31 UI // l. Una maggiore concentrazione di ALT e AST nell'epatite C asintomatica è spesso l'unico sintomo di questa malattia. Inoltre, aumenta il livello di fosfatasi alcalina glutamil transpeptidasi nella composizione del sangue (normalmente non superiore a 150 UI / l).
  • viene superato il contenuto di bilirubina (sia generale che diretta) nel sangue. Se il livello di pigmento giallo nel siero del sangue supera 27-34 μmol / L, si verifica l'ittero (fino a 80 μmol / L in forma lieve, 86-169 μmol / L in forma moderata, sopra 170 μmol / L in forma grave).
  • Il livello di albumina viene abbassato, la concentrazione di gamma globuline, al contrario, aumenta. Le globuline gamma sono composte da immunoglobuline - anticorpi che proteggono il corpo dai patogeni.
  • aumento della concentrazione di trigliceridi nel sangue.

Studio PCR

Usando la PCR, è possibile diagnosticare l'agente causale della malattia. L'esecuzione di questa analisi consente di rilevare un virus nel sangue, anche se la sua quantità è minima. L'analisi PCR per l'epatite C consente di determinare l'infezione esistente nel sangue dopo 5 giorni dal momento dell'infezione, cioè molto prima che appaiano gli anticorpi.

Se il risultato di un esame del sangue per l'epatite C mediante PCR è positivo, ciò indica la presenza di un'infezione attiva nel corpo. Utilizzando questo metodo, è possibile condurre uno studio qualitativo e quantitativo di RNA dell'HVC.

Nel corso di un'analisi qualitativa della PCR per l'epatite C, è possibile rilevare un virus esistente nel corpo umano.

Questa procedura diagnostica viene eseguita se viene rilevato anti-HVC nel sangue..

L'interpretazione del test dell'epatite C contiene informazioni sul fatto che un'infezione viene rilevata o non rilevata nel corpo. Allo stato normale, le sostanze patologiche nel sangue non vengono rilevate.

Se il test per l'epatite C dà un risultato positivo, questo indica che il microrganismo patogeno si divide continuamente e colpisce le cellule del fegato.

I risultati di tale analisi possono essere inaffidabili, ciò è possibile nei seguenti casi:

  • con contaminazione del biomateriale utilizzato;
  • in presenza di eparina nel sangue;
  • in presenza di sostanze chimiche o proteiche (inibitori) nel biomateriale studiato che influenzano gli elementi della PCR.

L'analisi quantitativa per l'epatite C fornisce informazioni sulla quantità di virus contenuta nel sangue, cioè determina la carica virale. Con questo concetto si intende la quantità di HVC RNA presente nel sangue (ad esempio, in 1 ml). Nella decodifica dell'analisi quantitativa per l'epatite C, questo valore è espresso in termini digitali, misurato in UI / ml.

Il sangue per PCR con epatite C viene donato prima di misure terapeutiche. Dopo che l'analisi viene eseguita a 1, 4, 12 e 24 settimane. Lo studio alla settimana 12 è indicativo e viene condotto al fine di valutare l'efficacia delle procedure di trattamento..

Se l'analisi dell'epatite C durante la gravidanza è positiva e i valori della carica virale vengono superati, il rischio di trasmissione di agenti patogeni da una madre malata a un bambino aumenta più volte. Inoltre, con l'aumento dei valori della carica virale, l'attuazione delle misure terapeutiche è difficile.

Secondo l'interpretazione dei test per l'epatite C, se i valori della carica virale superano gli 800.000 UI / ml, è elevato. Se i valori sono inferiori a 400.000 UI / ml, il livello di carica virale è considerato basso..

L'analisi PCR per l'epatite C è considerata la più accurata e presenta numerosi vantaggi rispetto ad altre opzioni di ricerca, vale a dire:

  • diagnosi diretta dell'agente causale della malattia. Quando si eseguono ricerche tradizionali, viene determinata la presenza di marcatori proteici, che sono i prodotti dell'attività vitale delle sostanze patogene. Dice solo che l'infezione è presente nel sangue. Quando si passa un'analisi dell'epatite C mediante PCR, è possibile determinare il tipo di agente patogeno di una patologia pericolosa.
  • specificità della tecnica. Durante questa procedura, nel biomateriale viene determinata un'unica regione del DNA che corrisponde a un solo tipo di patogeno. Ciò riduce al minimo la probabilità di risultati non veritieri..
  • alta sensibilità. Quando si esegue l'analisi PCR, è possibile rilevare una quantità minima di virus. Ciò è importante se vengono identificate sostanze opportunistiche che rappresentano una minaccia solo se il loro livello è aumentato..
  • quando si utilizza questa tecnica in un campione del biomateriale, è possibile rilevare contemporaneamente più agenti patogeni.
  • puoi rilevare infezioni nascoste. Inoltre, l'analisi consente di diagnosticare agenti patogeni che vivono all'interno delle cellule e presentano un'elevata variabilità antigenica.

Se i risultati dello studio sono positivi, vengono rilevate tracce del virus nel biomateriale, quindi la rete nel corpo ha un'infezione.

Un'analisi PCR negativa per l'epatite C indica che non vi sono tracce di infezione nel biomateriale.

Ricerca immunologica

Questo metodo consente di determinare gli anticorpi per tutti i tipi di virus dell'epatite, nonché gli anticorpi per le cellule del fegato del proprio corpo, il cui sviluppo è facilitato dallo sviluppo dell'epatite autoimmune.

I risultati ottenuti durante lo studio sono rilevanti per 3 mesi, quindi è necessario donare nuovamente sangue per l'epatite C..

È anche possibile effettuare uno studio esplicito utilizzando speciali strisce reattive. Questa analisi consente di determinare gli anticorpi contro il virus C nella composizione del sangue e della saliva.Questa procedura può essere eseguita in modo indipendente, a casa.

Biopsia epatica

Per eseguire tale analisi, viene preso un elemento del parenchima epatico e viene eseguito un esame istologico del biomateriale ottenuto. Ciò consente di valutare le condizioni del corpo: identificare focolai infiammatori, necrotici, stadio della fibrosi, ecc..

Oggi vengono utilizzati test che sostituiscono l'analisi istologica del parenchima epatico.

Biomarcatori specifici del sangue venoso vengono utilizzati per valutare lo stadio del danno epatico e l'intensità del processo infiammatorio. Utilizzando Fibrotest, è possibile valutare il grado di proliferazione del tessuto fibroso.

Quando si esegue Actitest, è possibile ottenere informazioni sull'intensità dei processi patologici nel parenchima epatico. Con l'aiuto dello Steatotest, è possibile diagnosticare la degenerazione grassa del tessuto epatico e valutare il grado di questo processo. Fibromax è costituito da tutti i test sopra riportati e può includere altri studi..

Preparazione allo studio

Abbiamo scoperto quali test vengono eseguiti per l'epatite C e come viene eseguito questo o quel tipo di studio. È altrettanto importante sapere come prepararsi per l'analisi..

Per ottenere risultati affidabili, si consiglia di rispettare i seguenti requisiti:

  • i test per l'epatite C devono essere effettuati al mattino, a stomaco vuoto. Il cibo dovrebbe essere consumato almeno 8 ore prima dello studio..
  • Il biomateriale può essere assunto di giorno o di sera. In questo caso, è importante che trascorrano almeno 5-6 ore tra l'ultimo pasto e l'analisi.
  • Prima di donare sangue per l'epatite C, è necessario rifiutare tè, caffè, succo di frutta o altre bevande, è consentita solo l'acqua.
  • 48 ore prima dello studio, è necessario escludere l'uso di cibi grassi, fritti e bevande contenenti alcol.
  • per almeno un'ora prima dell'analisi, astenersi dal fumare.
  • non eseguire analisi immediatamente dopo un esame ecografico, strumentale, a raggi X, massaggi o fisioterapia.
  • un giorno prima dello studio, è necessario escludere l'uso di farmaci e un'intensa attività fisica. Lo stress emotivo è anche controindicato..
  • Si consiglia di eseguire 15 minuti prima dello studio in uno stato calmo.

Prelievo di sangue

Dove sottoporsi al test per l'epatite C? Il biomateriale viene utilizzato per ulteriori ricerche nel laboratorio di un istituto medico o a casa del paziente.

Il sangue da una vena viene prelevato come segue:

  • con l'aiuto di un laccio emostatico speciale avvolto sull'avambraccio del paziente, il flusso venoso venoso viene sospeso. Grazie a tali manipolazioni, le vene saranno riempite di sangue e saranno più evidenti, il che faciliterà notevolmente il processo di introduzione dell'ago.
  • l'area della pelle in cui verrà inserito l'ago viene accuratamente trattata con alcool o un liquido contenente alcool.
  • un ago viene inserito con cura in una vena, quindi viene attaccato un tubo appositamente progettato per la raccolta del sangue.
  • immediatamente dopo l'inserimento dell'ago nella vena, il laccio emostatico di compressione viene rimosso dal braccio del paziente.
  • dopo che è stato raccolto il volume di sangue necessario per l'analisi, l'ago viene rimosso delicatamente dalla vena.
  • un tampone sterile di cotone o di garza imbevuto di alcool deve essere applicato nel sito di iniezione.
  • per prevenire il verificarsi di un ematoma, il tampone deve essere premuto con un certo sforzo nell'area di inserimento dell'ago, piegare il braccio sull'articolazione del gomito e tenerlo in questa posizione per diversi minuti. Tali azioni aiuteranno anche a fermare il sangue più velocemente..

A condizione che la tecnica di somministrazione interna sia buona, questa procedura è assolutamente sicura e non provoca dolore durante la lettura..

In rari casi, il gonfiore delle vene è possibile dopo il prelievo di sangue. Questo fenomeno si chiama flebite. Un impacco (non caldo) aiuterà a risolvere il problema, dovrebbe essere applicato su aree gonfie della pelle più volte al giorno.

Alcuni problemi possono verificarsi anche in presenza di un disturbo emorragico. L'assunzione di aspirina, warfarin e altri fluidificanti del sangue può causare sanguinamento. Ecco perché, prima di eseguire l'analisi, è necessario rifiutare di assumere qualsiasi farmaco. Se il trattamento non può essere annullato, informare uno specialista.

Date e prezzi

Quanto viene eseguito il test dell'epatite C? I risultati di un esame del sangue per l'epatite possono essere pronti in poche ore e in pochi giorni (di solito non più di 8 giorni). La durata della preparazione dei risultati dipende dal tipo di virus e dal metodo di analisi selezionato. Più veloce è lo studio condotto dalla PCR. I risultati in questo caso saranno pronti tra poche ore..

Quanto costa il test dell'epatite C? A seconda della clinica e della complessità dello studio, il prezzo della procedura può variare da 400 a 11.000 rubli.

Dovresti essere consapevole che potrebbero essere necessarie diverse settimane per formare un volume sufficiente di anticorpi anti-HVC. Pertanto, nelle prime fasi dello sviluppo della patologia, il risultato dello studio può essere falso negativo.

Inoltre, è possibile ottenere dati falsi con analisi di scarsa qualità e violazione delle condizioni di trasporto del biomateriale ottenuto (i campioni devono essere consegnati al laboratorio al massimo 2 ore dopo il prelievo di sangue).

Se il risultato dello studio è positivo, è necessario contattare immediatamente un medico di malattie infettive. Lo specialista effettuerà un ulteriore esame e prescriverà il trattamento appropriato..

PCR - diagnosi del virus dell'epatite C (quantitativamente)

Uno studio per identificare il patogeno dell'epatite C (HCV), in cui la presenza del materiale genetico (RNA) del virus e la sua quantità (carica virale) nel campione di sangue viene determinata usando il metodo di reazione a catena della polimerasi in tempo reale.

L'RNA dell'HCV può essere rilevato ad una concentrazione oltre il limite inferiore dell'intervallo di concentrazione lineare. L'intervallo di concentrazione lineare è l'intervallo in cui è possibile calcolare il numero esatto di copie dell'agente patogeno..

Reazione a catena della polimerasi per trascrizione inversa in tempo reale.

Quale biomateriale può essere utilizzato per la ricerca?

Come prepararsi allo studio?

Non fumare per 30 minuti prima di dare il sangue.

Panoramica dello studio

Virus dell'epatite C (HCV) - Un virus contenente RNA della famiglia delle Flaviviridae che infetta il fegato. Può moltiplicarsi nelle cellule del sangue (neutrofili, monociti e macrofagi, linfociti B) e causare crioglobulinemia, malattia di Sjogren e malattie linfoproliferative delle cellule B. Grazie alla sua elevata attività mutazionale, l'HCV è in grado di evitare gli effetti dei meccanismi protettivi del sistema immunitario. Esistono 6 genotipi e molti sottotipi del virus che hanno significati diversi per prevedere lo sviluppo della malattia e l'efficacia della terapia antivirale.

La principale via di trasmissione dell'infezione è attraverso il sangue (farmaci per trasfusioni di sangue e elementi del plasma, organi di donatori, siringhe non sterili, aghi, strumenti per tatuaggi, piercing). È probabile che si verifichi un'infezione dovuta al contatto sessuale e al bambino della madre durante il parto, ma ciò accade raramente.

L'epatite virale acuta, di regola, è caratterizzata da un decorso asintomatico e nella maggior parte dei casi non viene rilevata. Solo nel 15% delle persone infette la malattia è acuta - con nausea, dolori muscolari, mancanza di appetito e perdita di peso (raramente accompagnata da ittero). Nel 60-85% delle persone infette si sviluppa un'infezione cronica, che è 15 volte superiore alla frequenza di cronicità nell'epatite B. Nel 20-30% dei pazienti, la malattia porta alla cirrosi, aumentando il rischio di insufficienza epatica e carcinoma epatocellulare.

Attraverso la PCR, l'RNA del virus viene rilevato qualitativamente o quantitativamente. Grazie al metodo qualitativo, viene confermata la presenza del virus dell'epatite C e la sua riproduzione attiva. La determinazione quantitativa della carica virale, tenendo conto del genotipo dell'HCV, consente di controllare la terapia in corso e prevedere il decorso della malattia.

La durata della terapia e la frequenza di quantificazione dell'RNA del virus dell'epatite C dipendono dal genotipo del virus e dal grado di danno epatico.

A cosa serve lo studio??

  • Per confermare la diagnosi di epatite virale C.
  • Prevedere il decorso dell'epatite virale C.
  • Monitorare la terapia antivirale e decidere ulteriori tattiche di trattamento.

Cosa significano i risultati??

  • Non rilevato - RNA del virus dell'epatite C non rilevato o valore inferiore al limite di sensibilità del metodo (200 copie / ml = 400 UI / ml).
  • 2 * 10 ^ 6 copie / ml (> 4 * 10 ^ 6 UI / ml) - RNA del virus dell'epatite C rilevato. Alta viremia.
  • > 1,0 * 10 ^ 8 copie / ml (> 2 * 10 ^ 8 UI / ml) - L'RNA del virus dell'epatite C è stato rilevato a una concentrazione superiore all'intervallo di concentrazione lineare.

L'intervallo lineare delle concentrazioni di RNA del virus dell'epatite C determinate dall'amplificatore di rilevamento è 7,5 * 10 ^ 2 - 1,0 * 10 ^ 8 copie / ml (1,5 * 10 ^ 3 - 2 * 10 ^ 8 UI / ml).

  • Il livello di carica virale del sangue non indica il grado di danno epatico e la gravità della malattia. Per valutarli, è necessario studiare i parametri biochimici e i materiali bioptici.
  • Quando si pianifica un trattamento, è molto importante determinare il genotipo del virus dell'epatite C..

Analisi PCR per epatite con trascrizione

L'epatite C è una malattia virale del fegato causata da HCV flavivirus (dal virus dell'epatite C inglese), la cui struttura contiene una molecola di acido ribonucleico (RNA). L'RNA contiene il codice genetico del virus. La sua presenza consente l'analisi della PCR per l'epatite C.

Il pericolo di HCV per l'uomo sta nel fatto che la cosiddetta finestra sierologica (l'intervallo di tempo tra infezione e comparsa della reazione dal sistema immunitario) può essere piuttosto lunga - da alcune settimane a sei mesi.

Questo previene l'infezione e inizia il trattamento in tempo..

A seconda delle caratteristiche individuali dell'organismo del portatore, l'HCV può manifestarsi in forma acuta, oltre a procedere come una malattia cronica che richiederà un trattamento lungo e costoso. Quando si rilevano anticorpi contro l'HCV, vengono eseguiti numerosi test di laboratorio, inclusa la PCR per l'epatite C. Questo test viene eseguito per tutte le persone in cui sono stati trovati anticorpi anti-HCV nel sangue..

Cos'è l'analisi PCR??

Analisi di laboratorio della PCR per l'epatite C - uno studio di materiale biologico per rilevare la presenza di flavavirus.

La reazione a catena della polimerasi (l'abbreviazione è decifrata) mostra il valore quantitativo dell'infezione virale del corpo, le sue caratteristiche qualitative, nonché il genotipo del virus contenente RNA.

Sulla base di questi, nonché sulla base di analisi aggiuntive, vengono determinati il ​​metodo e la durata della terapia, nonché il fattore epidemiologico (il grado di rischio di trasmissione a un altro vettore).

Che cos'è l'analisi dell'RNA dell'epatite C.?

L'epatite C PCR è anche chiamata analisi dell'RNA (HCV RNA), perché flavavirus contiene una particella di RNA con una dimensione del virione di 30-60 nm. Una delle caratteristiche di questo microrganismo è la sua elevata suscettibilità alle mutazioni..

Ognuna delle sottospecie (genotipi) del virus ha una resistenza diversa, che porta a diversi metodi di trattamento e alla natura dell'ulteriore prognosi per il paziente.

Il materiale biologico (sangue venoso) viene consegnato a stomaco vuoto e, di norma, viene testato mediante Real-Time PCR (diagnostica in tempo reale altamente sensibile con un limite inferiore di rilevazione di 15 UI / ml utilizzando sistemi automatici chiusi).

Esistono altri test, ad esempio COBAS AMPLICOR con una sensibilità di 50-100 UI / ml. Per qualsiasi test di laboratorio, la soglia di sensibilità è importante, ad es. la capacità del reagente di rilevare la concentrazione minima del virus nel materiale biologico.

Valore di riferimento del test (indicatori normali) - "non trovato".

Tipi di analisi per l'epatite C mediante PCR

La PCR per l'epatite C comprende tre componenti importanti:

analisi qualitativa; analisi quantitativa; genotipizzazione.

Questi test consentono di determinare la natura della viremia, nonché i segni genetici dell'agente patogeno. A seconda della sensibilità del sistema diagnostico, lo studio viene eseguito una volta e talvolta viene eseguito un test ripetuto con un reagente più sensibile per confermare o perfezionare i risultati.

PCR qualitativa per l'epatite C

L'analisi qualitativa della PCR per l'epatite C è un altro nome comune per l'analisi della reazione a catena della polimerasi. La sensibilità standard del test per rilevare la presenza di danno virale è compresa tra 10 e 500 UI / ml.

Un'analisi PCR negativa per l'epatite C mostra che la concentrazione del virus nel sangue del paziente è inferiore alla soglia diagnostica del sistema diagnostico.

Se la PCR di alta qualità ha dato la risposta "non trovata", per il trattamento successivo è importante conoscere la soglia di sensibilità del reagente.

Una risposta positiva all'analisi della PCR per l'epatite C può essere data già 4-5 giorni dopo l'infezione da HCV.

Le frazioni proteiche del flavavirus compaiono molto più tardi.

PCR quantitativa di epatite C

L'epatite C PCR quantitativa è un indicatore della carica virale, che mostra il livello di concentrazione di RNA del flavavirus nel corpo. Questo è un indicatore che mostra quanti frammenti di RNA virale sono contenuti per centimetro cubo di sangue. I risultati del test quantitativo di PCR dell'epatite C RNA nel sistema generalmente accettato sono indicati in unità internazionali per millilitro (UI / ml) e possono essere registrati in vari modi, ad esempio 1,7 milioni o 1,700.000 UI / ml.

La diagnosi quantitativa di PCR dell'epatite C viene prescritta ai pazienti prima di iniziare la terapia antivirale e a 12 settimane di trattamento per valutare i risultati del metodo scelto per combattere l'HCV. La carica virale consente di determinare tre importanti indicatori della malattia:

infettività, ad es. il grado di rischio di trasmissione del virus da un portatore all'altro (maggiore è la concentrazione di flavavirus RNA, maggiore è la probabilità di infettare un'altra persona, ad esempio attraverso il contatto sessuale); metodo ed efficacia del trattamento; durata e prognosi della terapia antivirale (maggiore è la carica virale, più lungo è il trattamento).

La diagnosi quantitativa di PCR dell'epatite C dipende dal tipo di test di laboratorio e dalla soglia della sua sensibilità. Il limite inferiore della norma è considerato un indicatore fino a 600.000 UI / ml, il valore medio è compreso tra 600.000 e 7.000.000 UI / ml. I risultati a partire da 800.000 UI / ml e superiori sono considerati alti livelli di virus RNA..

Importante: non esiste una relazione diretta tra il livello di RNA dell'HCV nel sangue e la gravità della malattia. Il paziente può avere una carica virale molto elevata, ma ciò non indica ancora che vi sia un grave danno alle cellule del fegato.

genotipizzazione

A causa dell'elevata attività mutazionale dell'HCV in natura, durante i test è importante identificare quale genotipo del virus si trova nel sangue del paziente. In totale, 11 genotipi del virus dell'epatite C, che includono molte sottospecie (sottotipi), sono stati registrati sul pianeta. Nel territorio della Federazione Russa, 1,2 e 3 sono comuni.

L'epatite C RNA PCR insieme alla genotipizzazione è un componente molto importante dell'analisi, perché consente al medico di determinare la resistenza (resistenza) del virus, selezionare i farmaci appropriati e prescrivere un ciclo di trattamento.

Genotipi HCV diversi rispondono in modo diverso alla terapia antivirale. Ad esempio, 1 genotipo richiede fino a 48 settimane di trattamento e la sua efficacia è in media del 60%, mentre 2 e 3 genotipi vengono trattati due volte più velocemente con un'efficienza fino all'85%.

La genotipizzazione consente anche di determinare indirettamente le condizioni del fegato. Ad esempio, il genotipo 3 dell'HCV è spesso accompagnato da steatosi, in cui il grasso si accumula nelle cellule dell'organo.

Un esame del sangue per PCR per l'epatite C dovrebbe fornire una cifra che determina il genotipo. Nelle risposte di laboratorio, può essere scritto "non digitato" - e questo significa che c'è un virus nel sangue umano che non viene rilevato dal sistema di test. Ciò può indicare che il genotipo è insolito per questa area geografica. In questo caso, è necessario ripetere il test di un'analisi con una maggiore sensibilità del sistema diagnostico..

Decodifica analisi PCR per epatite C

Un test quantitativo di PCR per l'epatite C può essere decifrato in base ai dati di cui sopra. Al ricevimento dei risultati delle prove di laboratorio, vengono solitamente scritti i seguenti dati:

"Found" / "not found" (PCR di alta qualità per l'epatite C); la quantità di frazioni contenenti RNA, ad esempio 831.680 ME / ml (analisi quantitativa della PCR); una figura che definisce il genotipo dell'HCV, ad esempio 1, 2, 3, 4; nome del test - molto spesso in tempo reale.

Il secondo punto, che mostra la carica virale che determina la prognosi, il metodo e la durata del trattamento, è considerato il più importante quando si decodifica l'analisi della PCR per l'epatite C.

Importante: a seguito del test, accanto alla figura che mostra il genotipo, potrebbe esserci una lettera latina, ad esempio 1a, che indica il sottotipo del virus. Non importa per il medico: solo il genotipo viene utilizzato per selezionare un metodo di trattamento.

Se il test PCR per l'epatite C è negativo e ELISA è positivo, cosa significa?

Per decifrare i test di laboratorio, è importante contattare un epatologo o uno specialista in malattie infettive che spiegherà le informazioni ricevute in base al tipo di sistema diagnostico e alla soglia della sua sensibilità. Nella pratica medica, ci sono molti dati di esami del sangue che possono fuorviare una persona senza un'educazione medica.

Ad esempio, se il test per l'epatite C PCR è negativo e ELISA è positivo, allora potrebbe indicare che al momento il paziente non ha HCV nel sangue, ma in precedenza aveva subito una forma acuta di epatite C. È generalmente accettato che un saggio immunosorbente positivo correlato agli enzimi (ELISA) mostra che ci sono anticorpi nel sangue prodotti dopo un'invasione di virus in passato. Ma nella moderna pratica medica, l'analisi ELISA è considerata insufficientemente affidabile e spesso dà risultati atipici, quindi i medici lo usano come screening primario. Durante la diagnosi di una malattia, gli specialisti si concentrano sui test PCR.

Video utile

Il seguente video racconta dettagliatamente e in modo interessante qual è l'essenza del metodo PCR, come viene eseguita l'analisi:

Conclusione

Il sangue venoso viene solitamente prelevato per l'analisi dell'epatite C PCR. Molto spesso, si verifica un doppio campionamento di materiale biologico - per ELISA e direttamente per il test PCR. Per i risultati dei test corretti, è richiesta la conformità alle regole di base del campionamento di laboratorio di materiale biologico:

il sangue viene somministrato per analisi al mattino a stomaco vuoto; devono trascorrere almeno 8 ore tra l'assunzione di cibo e il prelievo di sangue; prima di sostenere il test, è inoltre necessario escludere alcol e cibi fritti; durante il giorno prima della donazione di sangue, è necessario evitare uno sforzo fisico elevato.

I risultati degli esami del sangue sono di solito pronti il ​​giorno successivo..

Uno speciale test di laboratorio - analisi PCR per l'epatite C - semplifica notevolmente la diagnosi di questa malattia virale. L'epatite C. non fa eccezione: un piccolo campione di sangue può essere controllato per il contenuto di RNA e altro materiale genetico dell'agente virale. L'analisi PCR viene eseguita su tutte le persone con anticorpi contro l'epatite C circolanti nel plasma sanguigno, la cui presenza ha confermato un rilevamento di alta qualità.

L'interpretazione dei risultati è interpretata nella colonna del modulo di ricerca come un'analisi "positiva" o "negativa". Inoltre, usando la PCR è possibile non solo determinare qualitativamente il contenuto minimo di virus, ma anche calcolare il numero di particelle. Pertanto, è possibile determinare la carica virale stimata e determinare le tattiche di trattamento medico nel modo più accurato possibile..

Danno virale al fegato

Il fegato come elemento del tratto digestivo assume un carico enorme. Nelle sue cellule si verificano la maggior parte delle reazioni metaboliche di tutti i tipi di metabolismo, il che garantisce il funzionamento ottimale di tutti gli organi e sistemi. Allo stesso tempo, il suo valore di disintossicazione è ottimo per la rimozione di tossine e prodotti metabolici con bile enzimatica.

Il danno al fegato da virus di varia natura è estremamente pericoloso per il corpo. Un quadro clinico diversificato e l'intrattabilità al trattamento portano l'epatite al primo posto in termini di pericolo per la salute. L'epatite C è di natura cronica e per lungo tempo può dare un risultato negativo al test, parassitando lentamente nel corpo umano. Il virus viene trasmesso attraverso fluidi biologici: sangue e meno spesso attraverso lo sperma. L'abuso narcotico di siringhe non sterili, la consegna naturale di donne infette, lesioni accidentali o tagli da parte degli operatori sanitari possono portare alla trasmissione del virus a persone sane.

La diagnosi tempestiva della malattia è complicata dal quadro clinico latente e dalla patologia non sistematica. Un risultato positivo può semplicemente essere mancato dall'analisi di scarsa qualità. Solo un danno significativo alle cellule del fegato provoca alcuni sintomi, tuttavia l'effetto negativo della viremia a quel tempo non lascia alcuna possibilità di ripristinare l'organo.

La medicina moderna ha sviluppato metodi speciali per riconoscere la più piccola traccia del virus. PCR, IFA, biopsia epatica possono rilevare il minimo danno al fegato e il livello minimo di anticorpi contro il virus. L'analisi PCR è la più semplice e affidabile nella pratica diagnostica..

Analisi qualitativa

L'essenza della reazione della polimerasi è generare la sequenza di RNA. La reazione viene effettuata in presenza delle stesse proteine ​​virali nel plasma sanguigno.

Catalizzatori speciali consentono la sintesi di una catena di sequenza virale simile, che viene confrontata con i nucleotidi noti dell'RNA virale. Sulla base di questo, vengono determinati la carica virale e il danno epatico.

I test PCR rivelano più informazioni rispetto al semplice rilevamento dell'RNA di un virus. Supera più volte la sensibilità dei metodi un tempo standard di IFA e altri isolamento virale..

La PCR è in grado di rilevare anche una singola presenza del gene desiderato nel sangue prelevato. Questa reazione a catena diagnostica è anche molto specifica. La sequenza delle catene nucleotidiche è unica per ogni creatura, così che i primer enzimatici creano sequenze identiche delle informazioni genetiche desiderate. Pertanto, qualsiasi virus può essere rilevato con la minima precisione, anche se il suo indicatore quantitativo è estremamente piccolo..

I pazienti nei quali il sangue ha sviluppato anticorpi contro l'epatite virale sono stati rilevati, conducono uno studio qualitativo della PCR o dell'IFA. Il risultato dell'analisi può essere positivo o negativo, che in entrambi i casi richiede un trattamento.

La risposta positiva della reazione a catena dovrebbe essere decifrata come presenza di frammenti di RNA del virus dell'epatite o come fenomeno di infezione.

Nel plasma sanguigno, il virus si sta attualmente moltiplicando e parassitando attivamente sulle cellule del fegato. La diagnostica PCR può dare una risposta negativa se ci sono poche particelle di RNA virale nel plasma, al di sotto del livello di sensibilità del test o per niente. Dopo l'infezione diretta, la quantità di virus cresce relativamente lentamente e solo dopo 1-2 settimane se uno o un altro studio qualitativo può isolarli.

Un'analisi negativa può essere ottenuta nei seguenti casi:

Quando si preleva materiale in condizioni inadeguate, si ottiene un campione di sangue con contaminazione; Con iniezioni di eparina fatte in precedenza su pazienti. In presenza di altri campioni di altri enzimi e substrati che interrompono la reazione a catena.

Analisi quantitativa

Un test quantitativo come diagnosi microbiologica è progettato per determinare la carica virale. Un'analisi qualitativa confermata per la viremia serve come base per determinare la quantità di materiale genetico e la sua concentrazione. Il numero di RNA virali rilevati è determinato per unità di volume di sangue, generalmente 1 millilitro. I materiali ricercati sono espressi in unità internazionali; alcuni laboratori utilizzano il numero di copie nelle analisi IFA.

In genere, prima di qualsiasi regime terapeutico, viene eseguito un test PCR quantitativo. Il conteggio dell'RNA virale viene effettuato abbastanza spesso: dopo una, quattro, dodici e ventiquattro settimane. La 12a settimana è considerata indicativa, poiché sulla base dell'analisi durante questo periodo viene effettuata una decrittazione dell'efficacia delle misure di trattamento.

Qualsiasi ricerca non richiede una fase preparatoria approfondita dei pazienti. L'unica cosa che è vietata prima di prendere il sangue è il fumo.

L'analisi quantitativa mediante PCR o IFA comporta il prelievo di campioni da una vena.

L'interpretazione dei risultati come elevata carica virale parte da una cifra di 800.000 UI / ml. Un risultato così positivo per l'epatite C riflette la presenza di almeno 3.000.000 di copie in un millilitro di sangue. Un basso livello di viremia si ferma a una cifra di 400.000 UI / ml. I risultati dello studio possono essere valori come una risposta negativa, nonché un indicatore "al di sotto del campo di misurazione".

Un test quantitativo con una valutazione "al di sotto dell'intervallo di misurazione" afferma che durante la reazione non è stato possibile calcolare l'RNA. Il virus sta ancora circolando nel corpo, come indicato da un test qualitativo positivo. Un indicatore negativo dell'analisi quantitativa di PCR o IFA indica l'assenza di RNA in questo campione di sangue.

La carica virale consente di decifrare il grado di infettività della patologia e il pericolo del paziente per gli altri. Un alto livello di RNA virale rilevato durante la PCR o IFA indica il rischio di "contagiosità" del paziente.

Nonostante i metodi limitati per la trasmissione del virus attraverso il sangue, aumenta il rischio di trasmettere il virus attraverso i segreti delle gonadi, da madre a figlio..

L'analisi quantitativa fornisce assistenza significativa nella valutazione degli interventi terapeutici. Ifa e PCR riflettono l'effetto dei farmaci antivirali, aiutano a stabilire i tempi della terapia e valutare la formazione dell'immunità dei pazienti. Una risposta negativa imminente da test di laboratorio indica un trattamento efficace e la necessità di ridurre la durata della terapia. Il declino lento della viremia può essere decifrato in quanto necessità di modificare il decorso terapeutico. Il livello di carica virale determina la prognosi della malattia. L'epatite con un indicatore basso può essere semplicemente trattata e il virus può essere completamente eliminato dal corpo. Alti livelli di presenza virale nel sangue richiedono un'attenta attenzione e un trattamento versatile.

L'epatite C è una patologia infiammatoria in cui sono colpite le cellule del fegato. La malattia si sviluppa a causa della penetrazione del virus dell'epatite C (HVC) nel corpo umano..

La forma della malattia può essere acuta o cronica..

Molto spesso, i sintomi di una forma acuta di patologia sono assenti nella maggior parte dei pazienti, a volte la malattia è accompagnata da dolore all'addome, riduzione della capacità lavorativa, aumento della stanchezza, alterazione dell'appetito, una tonalità scura dell'urina, scolorimento delle feci, giallo della pelle e delle mucose, dolori articolari. Questi sintomi di solito si verificano 6-8 settimane dopo l'infezione, ma possono verificarsi sei mesi dopo..

Con lo sviluppo di tali fenomeni, è necessario contattare un'istituzione medica e sottoporsi a un esame completo di tutto l'organismo. Come parte di una visita medica, viene eseguito un esame del sangue per l'epatite C.

Oggi, utilizzando moderne tecniche diagnostiche, questa patologia può essere rilevata nella fase iniziale di sviluppo, il che aumenta significativamente le possibilità di una cura completa per la malattia.

I seguenti gruppi di persone devono superare un'analisi per l'epatite C:

donne durante il periodo di gravidanza; persone con segni di epatite; dipendenti di istituti medici; potenziali donatori di organi e sangue; tossicodipendenti, affetti da HIV, persone che conducono una vita intima frenetica.

Elenco degli studi necessari

Quali test devono essere eseguiti con l'epatite C? Per un'accurata diagnosi della malattia, identificandone le cause e determinando lo stato del parenchima epatico, sono necessari i seguenti studi:

analisi generale di urina e sangue; analisi del sangue biochimica; Analisi PCR; un esame del sangue per rilevare anticorpi anti-HVC; un esame del sangue per gli anticorpi esistenti alle proprie cellule epatiche; biopsia epatica.

La decrittazione di un esame del sangue per l'epatite C viene eseguita da uno specialista. Considereremo ogni metodo di ricerca in modo più dettagliato e scopriremo anche quale test dell'epatite C è il più accurato..

Analisi generale

Quando si esegue un esame del sangue generale per l'epatite C, è possibile valutare le condizioni del paziente. I cambiamenti nell'emocromo non sono percepiti come sintomi specifici dell'epatite, tuttavia, con questa malattia, disturbi come:

la concentrazione di emoglobina, piastrine e globuli bianchi diminuisce; il contenuto di linfociti aumenta; la coagulazione del sangue è compromessa; aumenta la velocità di eritrosedimentazione (VES).

Un'analisi generale dell'urina consente di rilevare l'urobelina, un pigmento biliare che si verifica nelle urine a causa della compromissione della funzionalità epatica.

Analisi biochimiche

Un esame del sangue biochimico per l'epatite C può rilevare violazioni come:

aumento del contenuto di enzimi epatici (alanina transaminasi - ALT e aspartato aminotransferasi - AST), che entrano nel flusso sanguigno quando gli epatociti sono danneggiati. In condizioni normali, questi indicatori negli uomini non devono essere superiori a 37 UI / l, nelle donne - non superiori a 31 UI // l. Una maggiore concentrazione di ALT e AST nell'epatite C asintomatica è spesso l'unico sintomo di questa malattia. Inoltre, aumenta il livello di glutamil transpeptidasi della fosfatasi alcalina nella composizione del sangue (normalmente non superiore a 150 UI / l). viene superato il contenuto di bilirubina (sia generale che diretta) nel sangue. Se il livello di pigmento giallo nel siero del sangue supera 27-34 μmol / L, si verifica l'ittero (fino a 80 μmol / L in forma lieve, 86-169 μmol / L in forma moderata, sopra 170 μmol / L in forma grave). Il livello di albumina viene abbassato, la concentrazione di gamma globuline, al contrario, aumenta. Le globuline gamma sono composte da immunoglobuline - anticorpi che proteggono il corpo dai patogeni. aumento della concentrazione di trigliceridi nel sangue.

Studio PCR

Usando la PCR, è possibile diagnosticare l'agente causale della malattia. L'esecuzione di questa analisi consente di rilevare un virus nel sangue, anche se la sua quantità è minima. L'analisi PCR per l'epatite C consente di determinare l'infezione esistente nel sangue dopo 5 giorni dal momento dell'infezione, cioè molto prima che appaiano gli anticorpi.

Se il risultato di un esame del sangue per l'epatite C mediante PCR è positivo, ciò indica la presenza di un'infezione attiva nel corpo. Utilizzando questo metodo, è possibile condurre uno studio qualitativo e quantitativo di RNA dell'HVC.

Nel corso di un'analisi qualitativa della PCR per l'epatite C, è possibile rilevare un virus esistente nel corpo umano.

Questa procedura diagnostica viene eseguita se viene rilevato anti-HVC nel sangue..

L'interpretazione del test dell'epatite C contiene informazioni sul fatto che un'infezione viene rilevata o non rilevata nel corpo. Allo stato normale, le sostanze patologiche nel sangue non vengono rilevate.

Se il test per l'epatite C dà un risultato positivo, questo indica che il microrganismo patogeno si divide continuamente e colpisce le cellule del fegato.

I risultati di tale analisi possono essere inaffidabili, ciò è possibile nei seguenti casi:

con contaminazione del biomateriale utilizzato; in presenza di eparina nel sangue; in presenza di sostanze chimiche o proteiche (inibitori) nel biomateriale studiato che influenzano gli elementi della PCR.

L'analisi quantitativa per l'epatite C fornisce informazioni sulla quantità di virus contenuta nel sangue, cioè determina la carica virale. Con questo concetto si intende la quantità di HVC RNA presente nel sangue (ad esempio, in 1 ml). Nella decodifica dell'analisi quantitativa per l'epatite C, questo valore è espresso in termini digitali, misurato in UI / ml.

Il sangue per PCR con epatite C viene donato prima di misure terapeutiche. Dopo che l'analisi viene eseguita a 1, 4, 12 e 24 settimane. Lo studio alla settimana 12 è indicativo e viene condotto al fine di valutare l'efficacia delle procedure di trattamento..

Se l'analisi dell'epatite C durante la gravidanza è positiva e i valori della carica virale vengono superati, il rischio di trasmissione di agenti patogeni da una madre malata a un bambino aumenta più volte. Inoltre, con l'aumento dei valori della carica virale, l'attuazione delle misure terapeutiche è difficile.

Secondo l'interpretazione dei test per l'epatite C, se i valori della carica virale superano gli 800.000 UI / ml, è elevato. Se i valori sono inferiori a 400.000 UI / ml, il livello di carica virale è considerato basso..

L'analisi PCR per l'epatite C è considerata la più accurata e presenta numerosi vantaggi rispetto ad altre opzioni di ricerca, vale a dire:

diagnosi diretta dell'agente causale della malattia. Quando si eseguono ricerche tradizionali, viene determinata la presenza di marcatori proteici, che sono i prodotti dell'attività vitale delle sostanze patogene. Dice solo che l'infezione è presente nel sangue. Quando si supera il test dell'epatite C mediante PCR, è possibile determinare il tipo di agente patogeno di una patologia pericolosa. specificità della tecnica. Durante questa procedura, nel biomateriale viene determinata un'unica regione del DNA che corrisponde a un solo tipo di patogeno. Ciò riduce al minimo la probabilità di risultati non veritieri. alta sensibilità. Quando si esegue l'analisi PCR, è possibile rilevare una quantità minima di virus. Ciò è importante se vengono rilevate sostanze opportunistiche che rappresentano una minaccia solo se il loro livello è aumentato. quando si utilizza questa tecnica in un campione di biomateriale, è possibile rilevare contemporaneamente più agenti patogeni. puoi rilevare infezioni nascoste. Inoltre, l'analisi consente di diagnosticare agenti patogeni che vivono all'interno delle cellule e presentano un'elevata variabilità antigenica.

Se i risultati dello studio sono positivi, vengono rilevate tracce del virus nel biomateriale, quindi la rete nel corpo ha un'infezione.

Un'analisi PCR negativa per l'epatite C indica che non vi sono tracce di infezione nel biomateriale.

Ricerca immunologica

Questo metodo consente di determinare gli anticorpi per tutti i tipi di virus dell'epatite, nonché gli anticorpi per le cellule del fegato del proprio corpo, il cui sviluppo è facilitato dallo sviluppo dell'epatite autoimmune.

I risultati ottenuti durante lo studio sono rilevanti per 3 mesi, quindi è necessario donare nuovamente sangue per l'epatite C..

È anche possibile effettuare uno studio esplicito utilizzando speciali strisce reattive. Questa analisi consente di determinare gli anticorpi contro il virus C nella composizione del sangue e della saliva.Questa procedura può essere eseguita in modo indipendente, a casa.

Biopsia epatica

Per eseguire tale analisi, viene preso un elemento del parenchima epatico e viene eseguito un esame istologico del biomateriale ottenuto. Ciò consente di valutare le condizioni del corpo: identificare focolai infiammatori, necrotici, stadio della fibrosi, ecc..

Oggi vengono utilizzati test che sostituiscono l'analisi istologica del parenchima epatico.

Biomarcatori specifici del sangue venoso vengono utilizzati per valutare lo stadio del danno epatico e l'intensità del processo infiammatorio. Utilizzando Fibrotest, è possibile valutare il grado di proliferazione del tessuto fibroso.

Quando si esegue Actitest, è possibile ottenere informazioni sull'intensità dei processi patologici nel parenchima epatico. Con l'aiuto dello Steatotest, è possibile diagnosticare la degenerazione grassa del tessuto epatico e valutare il grado di questo processo. Fibromax è costituito da tutti i test sopra riportati e può includere altri studi..

Preparazione allo studio

Abbiamo scoperto quali test vengono eseguiti per l'epatite C e come viene eseguito questo o quel tipo di studio. È altrettanto importante sapere come prepararsi per l'analisi..

Per ottenere risultati affidabili, si consiglia di rispettare i seguenti requisiti:

i test per l'epatite C devono essere effettuati al mattino, a stomaco vuoto. L'ultima volta, il cibo dovrebbe essere consumato almeno 8 ore prima dello studio. Il biomateriale può essere assunto di giorno o di sera. In questo caso, è importante che trascorrano almeno 5-6 ore tra l'ultimo pasto e l'analisi. Prima di donare sangue per l'epatite C, è necessario rifiutare tè, caffè, succo di frutta o altre bevande, è consentita solo l'acqua. 48 ore prima dello studio, è necessario escludere l'uso di cibi grassi, fritti e bevande contenenti alcol. per almeno un'ora prima dell'analisi, è necessario astenersi dal fumare. L'analisi non deve essere eseguita immediatamente dopo un esame ecografico, strumentale, a raggi X, un massaggio o una fisioterapia. un giorno prima dello studio, è necessario escludere l'uso di farmaci e un'intensa attività fisica. Lo stress emotivo è anche controindicato. Si consiglia di eseguire 15 minuti prima dello studio in uno stato calmo.

Prelievo di sangue

Dove sottoporsi al test per l'epatite C? Il biomateriale viene utilizzato per ulteriori ricerche nel laboratorio di un istituto medico o a casa del paziente.

Il sangue da una vena viene prelevato come segue:

con l'aiuto di un laccio emostatico speciale avvolto sull'avambraccio del paziente, il flusso venoso venoso viene sospeso. Grazie a tali manipolazioni, le vene saranno riempite di sangue e saranno più evidenti, il che faciliterà notevolmente il processo di introduzione dell'ago. l'area della pelle in cui verrà inserito l'ago viene accuratamente trattata con alcool o un liquido contenente alcool. Un ago viene inserito con cura in una vena, quindi viene attaccato un tubo appositamente progettato per la raccolta del sangue. immediatamente dopo l'inserimento dell'ago nella vena, il laccio emostatico di compressione viene rimosso dal braccio del paziente. dopo che è stato raccolto il volume di sangue necessario per l'analisi, l'ago viene rimosso senza problemi dalla vena. un tampone sterile di cotone o di garza imbevuto di alcool deve essere applicato nel sito di iniezione. per prevenire il verificarsi di un ematoma, il tampone deve essere premuto con un certo sforzo nell'area di inserimento dell'ago, piegare il braccio sull'articolazione del gomito e tenerlo in questa posizione per diversi minuti. Tali azioni aiuteranno anche a fermare il sangue più velocemente..

A condizione che la tecnica di somministrazione interna sia buona, questa procedura è assolutamente sicura e non provoca dolore durante la lettura..

In rari casi, il gonfiore delle vene è possibile dopo il prelievo di sangue. Questo fenomeno si chiama flebite. Un impacco (non caldo) aiuterà a risolvere il problema, dovrebbe essere applicato su aree gonfie della pelle più volte al giorno.

Alcuni problemi possono verificarsi anche in presenza di un disturbo emorragico. L'assunzione di aspirina, warfarin e altri fluidificanti del sangue può causare sanguinamento. Ecco perché, prima di eseguire l'analisi, è necessario rifiutare di assumere qualsiasi farmaco. Se il trattamento non può essere annullato, informare uno specialista.

Date e prezzi

Quanto viene eseguito il test dell'epatite C? I risultati di un esame del sangue per l'epatite possono essere pronti in poche ore e in pochi giorni (di solito non più di 8 giorni). La durata della preparazione dei risultati dipende dal tipo di virus e dal metodo di analisi selezionato. Più veloce è lo studio condotto dalla PCR. I risultati in questo caso saranno pronti tra poche ore..

Quanto costa il test dell'epatite C? A seconda della clinica e della complessità dello studio, il prezzo della procedura può variare da 400 a 11.000 rubli.

Dovresti essere consapevole che potrebbero essere necessarie diverse settimane per formare un volume sufficiente di anticorpi anti-HVC. Pertanto, nelle prime fasi dello sviluppo della patologia, il risultato dello studio può essere falso negativo.

Inoltre, è possibile ottenere dati falsi con analisi di scarsa qualità e violazione delle condizioni di trasporto del biomateriale ottenuto (i campioni devono essere consegnati al laboratorio al massimo 2 ore dopo il prelievo di sangue).

Se il risultato dello studio è positivo, è necessario contattare immediatamente un medico di malattie infettive. Lo specialista effettuerà un ulteriore esame e prescriverà il trattamento appropriato..

Pensi che sia impossibile curare l'epatite C?

Oggi, i moderni farmaci della nuova generazione Sofosbuvir e Daclatasvir hanno il 97-100% di probabilità di curare permanentemente l'epatite C. Gli ultimi farmaci possono essere acquistati in Russia dal rappresentante ufficiale del gigante farmaceutico indiano Zydus Heptiza. I farmaci ordinati verranno consegnati tramite corriere entro 4 giorni, pagamento alla ricezione. È possibile ottenere una consulenza gratuita sull'uso di droghe moderne, nonché conoscere i metodi di acquisizione, sul sito Web ufficiale del fornitore Zydus in Russia.

Uno speciale test di laboratorio - analisi PCR per l'epatite C - semplifica notevolmente la diagnosi di questa malattia virale. L'epatite C. non fa eccezione: un piccolo campione di sangue può essere controllato per il contenuto di RNA e altro materiale genetico dell'agente virale. L'analisi PCR viene eseguita su tutte le persone con anticorpi contro l'epatite C circolanti nel plasma sanguigno, la cui presenza ha confermato un rilevamento di alta qualità.

L'interpretazione dei risultati è interpretata nella colonna del modulo di ricerca come un'analisi "positiva" o "negativa". Inoltre, usando la PCR è possibile non solo determinare qualitativamente il contenuto minimo di virus, ma anche calcolare il numero di particelle. Pertanto, è possibile determinare la carica virale stimata e determinare le tattiche di trattamento medico nel modo più accurato possibile..

Danno virale al fegato

Il fegato come elemento del tratto digestivo assume un carico enorme. Nelle sue cellule si verificano la maggior parte delle reazioni metaboliche di tutti i tipi di metabolismo, il che garantisce il funzionamento ottimale di tutti gli organi e sistemi. Allo stesso tempo, il suo valore di disintossicazione è ottimo per la rimozione di tossine e prodotti metabolici con bile enzimatica.

Il danno al fegato da virus di varia natura è estremamente pericoloso per il corpo. Un quadro clinico diversificato e l'intrattabilità al trattamento portano l'epatite al primo posto in termini di pericolo per la salute. L'epatite C è di natura cronica e per lungo tempo può dare un risultato negativo al test, parassitando lentamente nel corpo umano. Il virus viene trasmesso attraverso fluidi biologici: sangue e meno spesso attraverso lo sperma. L'abuso narcotico di siringhe non sterili, la consegna naturale di donne infette, lesioni accidentali o tagli da parte degli operatori sanitari possono portare alla trasmissione del virus a persone sane.

La diagnosi tempestiva della malattia è complicata dal quadro clinico latente e dalla patologia non sistematica. Un risultato positivo può semplicemente essere mancato dall'analisi di scarsa qualità. Solo un danno significativo alle cellule del fegato provoca alcuni sintomi, tuttavia l'effetto negativo della viremia a quel tempo non lascia alcuna possibilità di ripristinare l'organo.

La medicina moderna ha sviluppato metodi speciali per riconoscere la più piccola traccia del virus. PCR, IFA, biopsia epatica possono rilevare il minimo danno al fegato e il livello minimo di anticorpi contro il virus. L'analisi PCR è la più semplice e affidabile nella pratica diagnostica..

Analisi qualitativa

L'essenza della reazione della polimerasi è generare la sequenza di RNA. La reazione viene effettuata in presenza delle stesse proteine ​​virali nel plasma sanguigno.

Catalizzatori speciali consentono la sintesi di una catena di sequenza virale simile, che viene confrontata con i nucleotidi noti dell'RNA virale. Sulla base di questo, vengono determinati la carica virale e il danno epatico.

La PCR è in grado di rilevare anche una singola presenza del gene desiderato nel sangue prelevato. Questa reazione a catena diagnostica è anche molto specifica. La sequenza delle catene nucleotidiche è unica per ogni creatura, così che i primer enzimatici creano sequenze identiche delle informazioni genetiche desiderate. Pertanto, qualsiasi virus può essere rilevato con la minima precisione, anche se il suo indicatore quantitativo è estremamente piccolo..

I pazienti nei quali il sangue ha sviluppato anticorpi contro l'epatite virale sono stati rilevati, conducono uno studio qualitativo della PCR o dell'IFA. Il risultato dell'analisi può essere positivo o negativo, che in entrambi i casi richiede un trattamento.

La risposta positiva della reazione a catena dovrebbe essere decifrata come presenza di frammenti di RNA del virus dell'epatite o come fenomeno di infezione.

Nel plasma sanguigno, il virus si sta attualmente moltiplicando e parassitando attivamente sulle cellule del fegato. La diagnostica PCR può dare una risposta negativa se ci sono poche particelle di RNA virale nel plasma, al di sotto del livello di sensibilità del test o per niente. Dopo l'infezione diretta, la quantità di virus cresce relativamente lentamente e solo dopo 1-2 settimane se uno o un altro studio qualitativo può isolarli.

Un'analisi negativa può essere ottenuta nei seguenti casi:

  1. Quando si preleva materiale in condizioni inadeguate, si ottiene un campione di sangue con contaminazione;
  2. Con precedenti iniezioni di eparina per il paziente.
  3. In presenza di altri campioni di altri enzimi e substrati che interrompono la reazione a catena.

Analisi quantitativa

Un test quantitativo come diagnosi microbiologica è progettato per determinare la carica virale. Un'analisi qualitativa confermata per la viremia serve come base per determinare la quantità di materiale genetico e la sua concentrazione. Il numero di RNA virali rilevati è determinato per unità di volume di sangue, generalmente 1 millilitro. I materiali ricercati sono espressi in unità internazionali; alcuni laboratori utilizzano il numero di copie nelle analisi IFA.

In genere, prima di qualsiasi regime terapeutico, viene eseguito un test PCR quantitativo. Il conteggio dell'RNA virale viene effettuato abbastanza spesso: dopo una, quattro, dodici e ventiquattro settimane. La 12a settimana è considerata indicativa, poiché sulla base dell'analisi durante questo periodo viene effettuata una decrittazione dell'efficacia delle misure di trattamento.

L'analisi quantitativa mediante PCR o IFA comporta il prelievo di campioni da una vena.

L'interpretazione dei risultati come elevata carica virale parte da una cifra di 800.000 UI / ml. Un risultato così positivo per l'epatite C riflette la presenza di almeno 3.000.000 di copie in un millilitro di sangue. Un basso livello di viremia si ferma a una cifra di 400.000 UI / ml. I risultati dello studio possono essere valori come una risposta negativa, nonché un indicatore "al di sotto del campo di misurazione".

Un test quantitativo con una valutazione "al di sotto dell'intervallo di misurazione" afferma che durante la reazione non è stato possibile calcolare l'RNA. Il virus sta ancora circolando nel corpo, come indicato da un test qualitativo positivo. Un indicatore negativo dell'analisi quantitativa di PCR o IFA indica l'assenza di RNA in questo campione di sangue.

Nonostante i metodi limitati per la trasmissione del virus attraverso il sangue, aumenta il rischio di trasmettere il virus attraverso i segreti delle gonadi, da madre a figlio..

L'analisi quantitativa fornisce assistenza significativa nella valutazione degli interventi terapeutici. Ifa e PCR riflettono l'effetto dei farmaci antivirali, aiutano a stabilire i tempi della terapia e valutare la formazione dell'immunità dei pazienti. Una risposta negativa imminente da test di laboratorio indica un trattamento efficace e la necessità di ridurre la durata della terapia. Il declino lento della viremia può essere decifrato in quanto necessità di modificare il decorso terapeutico. Il livello di carica virale determina la prognosi della malattia. L'epatite con un indicatore basso può essere semplicemente trattata e il virus può essere completamente eliminato dal corpo. Alti livelli di presenza virale nel sangue richiedono un'attenta attenzione e un trattamento versatile.

L'epatite acuta C è un'infezione virale diffusa. La malattia è antroponica, cioè in condizioni normali si sviluppa solo nel corpo umano. L'agente causale della malattia è il virus HCV. Per iniziare lo sviluppo dell'infezione, il virus deve andare direttamente al fegato. Il modo principale di infezione del corpo è attraverso il contatto con sangue infetto e / o suoi componenti. Il virus viene rilevato mediante un esame del sangue per l'epatite C mediante PCR..

La complessità della diagnosi di un'infezione prima di acquisire una forma cronica è che è asintomatica. La malattia viene spesso rilevata per caso, durante esami medici di routine, esami medici.

Caratteristiche della variabilità genetica dell'HCV

Il corpo umano non è in grado di rilevare e neutralizzare il virus dell'epatite C che è entrato nel corpo nelle prime fasi dell'infezione, che è associato alla variabilità genetica dell'HCV. Il filamento di RNA del virus ha una lunghezza di circa 10.000 nucleotidi, che vengono rapidamente sostituiti.

Attualmente sono noti 6 genotipi e oltre 90 sottotipi di HCV. Esistono i cosiddetti quasivid: variazioni multiple del virus dell'epatite C..

All'interno di un genotipo virale, si forma un gran numero di variazioni mutate e geneticamente correlate di esso. Diverse quasi-specie dello stesso genotipo sono il risultato dell'instabilità genetica dell'HCV. Si formano durante le mutazioni durante la propagazione del virus dell'epatite C..

La presenza di varie variazioni dello stesso genotipo spiega la risposta negativa del virus agli attacchi immunitari del corpo, nonché la conservazione della sua attività a lungo termine..

L'acquisizione di una forma cronica della malattia, la terapia con interferone inconcludente e il rischio di reinfezione sono il risultato di una mutazione genetica del virus.

Infezione

L'infezione acuta da epatite C viene trasmessa da sangue contaminato che entra nel flusso sanguigno di una persona sana. Questa via di trasmissione si chiama parenterale. Le persone a rischio di infezione sono quelle che possono entrare in contatto con sangue potenzialmente infetto. Questi sono impiegati di laboratori medici, pazienti che richiedono trasfusioni di sangue, trapianti di organi e anche sottoposti a dialisi..

Nei saloni di bellezza (servizi di piercing, tatuaggio, manicure, ecc.), Così come negli studi dentistici, tutte le manipolazioni devono essere eseguite in condizioni sanitarie utilizzando strumenti sterili, poiché l'HCV può entrare nel corpo attraverso strumenti contaminati.

Separatamente, le persone dipendenti dalla droga dovrebbero essere distinte. L'uso ripetuto della stessa siringa con un ago da parte di individui diversi aumenta significativamente il rischio di infezione. Sono i tossicodipendenti che costituiscono la maggior parte dei pazienti con epatite C e sono portatori del virus HCV.

In condizioni domestiche, l'infezione può diffondersi attraverso prodotti per l'igiene personale: spazzolini da denti, rasoi.

Tutti i metodi di trasmissione, ad eccezione del contatto con il sangue, sono chiamati con la parola comune via di infezione non parenterale. In questo modo, l'epatite C viene trasmessa molto raramente, che è associata a una bassa concentrazione del virus. La trasmissione sessuale non è superiore al 10% dei casi di infezione. La trasmissione del virus con il latte di una madre che allatta è un caso isolato..

A tutti coloro che sono ad aumentato rischio di infezione, così come quelli che sono stati sconsiderati a contatto con sangue infetto, si consiglia di effettuare esami del sangue per HCV.

Caratteristiche diagnostiche

A causa dell'assenza di sintomi specifici dell'epatite virale acuta C, nella maggior parte dei casi la malattia assume una forma cronica.

Nelle prime settimane dopo l'infezione (in media 3 settimane), l'RNA del virus dell'epatite C può essere rilevato nel sangue del paziente. Per rilevare il virus dell'epatite, il suo tipo, genotipo, è necessario uno studio di laboratorio sul materiale biologico: sangue e suo siero, linfa e frammenti di tessuto epatico. Tale studio viene condotto non solo per la diagnosi, ma anche per determinare la terapia con interferone di alta qualità.

Di norma, gli anticorpi anti-HCV vengono rilevati mediante saggio di immunoassorbimento enzimatico (ELISA). Questo studio fornisce una risposta esaustiva: "rilevato" o "non trovato". Di conseguenza, il campione è positivo o negativo. Gli anticorpi rilevati da ELISA non indicano sempre la presenza di HCV nel corpo. Spesso tale analisi fornisce risultati falsi positivi. Ciò è dovuto al fatto che una volta una persona ha contratto l'epatite C, ma si è verificata l'autoguarigione e gli anticorpi sono rimasti nel corpo. Se viene rilevato anti-HCV nel sangue del test, viene prescritto uno studio aggiuntivo sulla PCR per l'epatite C..

Tra i moderni metodi diagnostici, vale la pena evidenziare l'analisi della PCR per l'epatite C come la più alta qualità e precisione.

Usando la reazione a catena della polimerasi (PCR), sembra possibile identificare l'agente causale dell'epatite C (virus HCV). Questa tecnica diagnostica può rilevare il virus anche con una concentrazione minima di HCV nel substrato biologico solo 5 giorni dopo l'infezione. Ciò consente di iniziare la terapia antivirale anche prima di un danno epatico significativo, poiché in un periodo di tempo così breve il corpo non ha il tempo di sviluppare anticorpi.

La reazione a catena della polimerasi è divisa in due tipi: qualitativa e quantitativa.

L'analisi qualitativa della PCR per l'epatite C aiuta a rilevare la presenza di HCV nel sangue in quanto tale. Un risultato positivo di un esame del sangue della PCR indica un'infezione del corpo con HCV.

Viene eseguito un test PCR qualitativo per rilevare l'epatite C dopo un ELISA positivo, ovvero quando vengono rilevati anticorpi contro questo virus.

La decrittazione dell'analisi PCR indica la presenza o l'assenza del virus HCV nel corpo, ovvero il risultato della PCR è rispettivamente positivo o negativo.

Un esame del sangue di una persona sana che utilizza l'analisi PCR mostrerà sempre un risultato negativo.

Un test PCR quantitativo determina la carica virale (viremia), ovvero la concentrazione di HCV nel substrato biologico. Il decorso dell'intera malattia dipende dall'entità della carica virale. A basse concentrazioni, la terapia con interferone termina con un risultato positivo. A volte i tempi di trattamento possono essere ridotti.

Un'alta concentrazione di virus, al contrario, rende la terapia antivirale infruttuosa e aumenta il rischio di sviluppare gravi complicanze. Le persone con viremia alta possono trasmettere l'epatite C in modo non parenterale: attraverso il contatto sessuale, il contatto di routine, da madre a figlio.

La concentrazione del virus nel substrato biologico viene misurata in unità (UI) per 1 ml di sangue (meno spesso copie / ml). Se la decodifica dell'analisi quantitativa della PCR per l'epatite C mostra viremia superiore a 800.000 UI / ml (2 milioni di copie / ml), ciò indica un'alta concentrazione di HCV. Se la quantità è inferiore a 400.000 UI / ml (1 milione di copie / ml), la carica virale è considerata bassa..

Un esempio di test quantitativo di PCR per l'epatite C:

Una malattia chiamata epatite può influenzare seriamente il fegato e causare gravi infiammazioni. Esistono diversi tipi di epatite e i virus che provocano lo sviluppo della malattia possono essere divisi per genotipo a seconda della mutazione e della posizione geografica. Uno dei tipi comuni di malattia è di tipo C. Un'analisi quantitativa per l'epatite C, la cui decodifica viene eseguita dal medico curante, può procedere in forma acuta o diventare cronica.

Epatite C

Per determinare la diagnosi, viene eseguito uno studio di laboratorio appropriato. Come primo test di superficie, un'analisi qualitativa può essere utilizzata per mostrare se esiste un agente causativo di epatite nel corpo. Ma per stabilire lo stadio esatto della malattia e la nomina del trattamento, è necessario condurre un test quantitativo.

Il virus dell'epatite B viene trasmesso da persona a persona. La malattia ha un periodo di incubazione in cui i sintomi non si manifestano praticamente. Il tempo del decorso nascosto della malattia dipende dal sistema immunitario umano e dalla quantità di virus che è entrata nel corpo. I medici hanno stabilito le seguenti principali vie di trasmissione dell'epatite C:

  • Probabilità del 47% di contrarre il virus attraverso il sangue durante l'uso di siringhe non sterili comuni durante la somministrazione endovenosa di farmaci. Un organismo indebolito dall'influenza delle sostanze narcotiche non può resistere al virus e la malattia si diffonde.
  • Probabilità del 22% di contrarre l'epatite con trasfusioni di sangue. A causa dell'elevato rischio di contrarre epatite, HIV e altre malattie attraverso la donazione di sangue, le istituzioni mediche sottopongono tutti i campioni biologici a test obbligatori prima dell'uso. Se si osserva questa regola, il rischio di infezione è minimo.
  • 16% di rischio di contrarre l'epatite quando si usano strumenti medici non sterili. Di norma, tutti i medici controllano attentamente le attrezzature e le forniture. Ma se non vengono seguite le precauzioni di sicurezza, è possibile l'infezione da epatite o altre malattie.
  • Probabilità del 13% di trasmettere il virus da una madre infetta a un feto in crescita.
  • Probabilità del 12% di contrarre il virus attraverso il contatto sessuale senza usare il preservativo con un partner sessuale occasionale. Secondo le statistiche per le coppie omosessuali, il rischio è maggiore.

Sintomi della malattia

Normale, cioè uno stato sano è considerata l'assenza di qualsiasi manifestazione grave di malessere. Il pericolo del virus dell'epatite è che la malattia potrebbe non produrre sintomi forti. Segni evidenti della malattia (vomito, improvvisa perdita di peso, ecc.) Si manifestano solo nel 15% dei casi. Nel restante 85% dei pazienti, i sintomi appaiono piuttosto debolmente. È necessario monitorare il tuo benessere e rispondere al deterioramento.

  • Il segno più caratteristico dei problemi al fegato è il giallo della pelle e le proteine ​​degli occhi. Questi segni corrispondono non solo al virus dell'epatite, ma anche ad altre malattie del fegato..
  • L'aspetto delle vene del ragno sulla pelle. I pastelli dei capillari che si trovano vicino alla pelle si espandono a causa della presenza del virus nel sangue e compaiono le "stelle".
  • "Palme epatiche" è un sintomo che è accompagnato da arrossamento dei palmi delle mani e talvolta dei piedi. Questo fenomeno è anche chiamato eritema palmare e di solito appare con le vene del ragno..
  • Gli effetti tossici irritanti del virus sul corpo possono causare prurito alla pelle..
  • A causa di un cambiamento nella composizione chimica del sangue, il tasso di coagulazione può essere compromesso.
  • L'esposizione prolungata del virus al corpo porta a compromissione della funzione cerebrale (encefalopatia acquisita).
  • Forse il verificarsi di sanguinamento interno.
  • La funzionalità epatica compromessa può portare all'accumulo di liquidi nell'addome (ascite).
  • Alla fine della giornata, l'edema appare sulle gambe del paziente.

La manifestazione di uno o due sintomi è caratteristica di un'ampia varietà di malattie. Molto spesso, il malessere è spiegato da affaticamento fisico o grave stress psicologico e stress. Se trovi diversi sintomi caratteristici nell'elenco, ha senso fare un'analisi quantitativa per l'epatite C..

Tipi di analisi

Uno dei metodi più affidabili e affidabili per diagnosticare l'epatite è una reazione a catena della polimerasi o PCR. A differenza di altri tipi di studi (ELISA o RIF), l'analisi della PCR per l'epatite consente di rilevare direttamente il materiale genetico del virus, piuttosto che gli anticorpi per combatterlo. Ciò consente una diagnosi accurata. Gli anticorpi anti-virus persistono nel corpo umano anche dopo il completo recupero. In questo caso, ELISA rileverà gli anticorpi in una persona perfettamente sana, cioè il risultato sarà positivo. Non esiste tale problema con l'analisi PCR.

La norma per l'indicatore è un numero vicino a zero. Cioè, una persona sana, in linea di principio, non dovrebbe avere cellule virali nel corpo. La PCR quantitativa riflette il numero di cellule virali che si trovano nel campione biologico di prova. Sulla base dei dati ottenuti, il medico può concludere circa il grado di infezione del corpo nel suo insieme. La concentrazione del virus indica lo stadio della malattia e consente di tenere traccia del tempo approssimativo dell'infezione.

Indicatore quantitativo

È importante non solo preparare adeguatamente l'analisi e passare il campione biologico al laboratorio, ma anche decodificare i dati. Questo dovrebbe essere fatto solo da un medico qualificato. Naturalmente, sul modulo con il risultato ci sono già informazioni sulle norme accettate e i valori del paziente sono apposti. Tuttavia, le cifre non sono tutto; l'esperienza e le conoscenze mediche forniscono maggiori informazioni. La tabella mostra cosa può mostrare il risultato di un'analisi PCR per l'epatite di tipo C quantitativo: